实验一糖的呈色反应PPT讲座.ppt

目的要求学****鉴定糖类及区分***糖和醛糖的方法了解鉴定还原糖的方法及其原理糖相关知识单糖中的果糖是***糖,而葡萄糖是醛糖。所有的单糖都是还原糖;还原性的二糖有乳糖和麦芽糖,蔗糖是非还原性二糖。糖的呈色反应和定性鉴定Ⅰ.Molish反应——α-萘酚反应Ⅱ.蒽***反应Ⅲ.***糖的Seliwanoff反应Ⅳ.Fehling试验Ⅴ.Benedict试验Ⅵ.Barfoed试验I、Molish反应——α-萘酚反应实验原理:糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环,因此又称紫环反应。糠醛紫红色复合物Molish反应α-萘酚也可用麝香草酚或其他的苯酚化合物代替,麝香草酚溶液比较稳定,其灵敏度与α-萘酚一样。单糖、双糖、多糖一般都发生此反应,但氨基糖不发生此反应。***、甲酸、乳酸、草酸、葡萄糖醛酸、各种醛糖衍生物、甘油醛等均产生近似的颜色反应。因此,阴性反应证明没有糖类物质的存在;而阳性反应,则说明有糖存在的可能性,需要进一步通过其他糖的定性试验才能确定有糖的存在。Molish反应非常灵敏,%%蔗糖即能呈现阳性反应。因此,不可在样品中混入纸屑等杂物。当果糖浓度过高时,由于浓硫酸对它的焦化作用,将呈现红色及褐色而不呈紫色,需稀释后再做。Molish反应操作方法取试管,编号,分别加入各待测糖溶液1mL,然后加两滴Molish试剂,摇匀。倾斜试管,沿管壁小心加入约1mL浓硫酸,切勿摇动,小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。用水代替糖溶液,重复一遍,观察结果。II、蒽***反应实验原理:糖经浓酸作用后生成的糠醛及其衍生物与蒽***(10-***-9,10-二氢蒽)作用生成蓝绿色复合物。该复合物在630nm有最大的吸收峰,并且在一定范围内,颜色与糖量的多少成正比,该方法可以用于测定几乎所有碳水化合物的含量,包括戊糖、己糖,多糖等。在测定水溶性碳水化合物含量时切勿将未溶解的沉淀部分混入试剂中,否则会将细胞壁中的纤维和半纤维素混入样品,造成所测定值的升高。不同的糖类与蒽***试剂反应后的颜色深度不同,果糖显色最深,葡萄糖次之,半乳糖和甘露糖较浅,五碳糖更浅,故在测定混合糖的含量时会应为混合物中不同糖的比例不同造成误差。在测定单一糖类的时候可避免此类的误差。蒽***反应操作方法取试管,编号,均加入1ml蒽***溶液,再向各管滴加2~3滴待测糖溶液,充分混匀,观察各管颜色变化并记录。III、***糖的Seliwanoff反应(西列瓦诺夫反应)实验原理:***糖在酸的作用下较醛糖更易生成羟***糠醛。后者与间苯二酚作用生成鲜红色复合物,反应仅需20-30秒。醛糖在浓度较高时或长时间煮沸,才产生微弱的阳性反应。该反应是鉴定***糖的特殊反应。果糖与Seliwanoff试剂反应非常迅速,呈鲜红色,而葡萄糖所需时间较长,且只能产生黄色至淡黄色。戊糖亦与Seliwanoff试剂反应,戊糖经酸脱水生成糠醛,与间苯二酚缩合,生成绿色至蓝色产物。***基本身没有还原性,只有在变成烯醇式后,才显示还原作用。***糖的Seliwanoff反应操作方法取试管,编号,各加入Sediwanoff试剂1mL,再依次分别加入待测糖溶液各4滴,混匀,同时放入沸水浴中,比较各管颜色的变化过程。