Bmi-1启动子介导Bmi-1干扰靶向性治疗胃癌的研究.pdf

:肿瘤干细胞理论的提出为目前肿瘤的不可治愈性、复发与转移等特性提供了很好的解释,越来越多的研究证实肿瘤干细胞的存在。肿瘤干细胞是肿瘤中一小部分具有干细胞性质的细胞群体,具有自我更新的能力,是形成不同分化程度的肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉。肿瘤干细胞虽占肿瘤细胞的比重很低,但由于其处于静止期且常高表达耐药相关基因,表现为化、放疗抵抗,同时其具有的高转移能力,亦成为肿瘤治疗失败、复发的根源。肿瘤干细胞研究已成为目前肿瘤研究的热点。目前己成功分离乳腺癌、脑胶质瘤、肝癌、结肠癌等肿瘤干细胞,但胃癌干细胞的研究报道较少,目前发现CD44+处于静息或较低的增殖状态细胞可能是体内胃癌细胞的来源,CD44+胃癌细胞具有类干细胞特性,表现为较高的成瘤性和化、放疗抵抗。亦有报道CDl33+胃癌细胞具有肿瘤干细胞样特性。从胃癌中分离的SP(sidepopulation)细胞表现较高的腹膜粘附性和转移性,目前对胃癌干细胞的分离方法仍很不成熟,更缺乏靶向肿瘤干细胞的治疗方法。;Hedgehog信号传导通路的过度活化为肿瘤干细胞形成与无限增殖的元凶之一,。可见,Bmi一1可能在肿瘤干细胞特性的维持中发挥重要作用,可能成为肿瘤干细胞的治疗靶点。方法:无血清培养法、细胞表面标记CD44、CDl33流式细胞分选分离胃癌干细胞;从肿瘤干细胞标志物检测、化疗抵抗、高转移性和体内成瘤性等四个方面特性鉴定胃癌干细胞;。结果:从胃癌细胞株及原代胃癌细胞中分离出微球体具有胃癌干细胞样特性;CDl33(+)或CD44(+)胃癌细胞具有化疗抵抗、更高的转移能力和成瘤能力;;。结论:Bmi一1在维持胃癌干细胞特性及化疗耐药中发挥作用,干扰其表达后可部分逆转其干细胞特性和提高化疗药物敏感性。、外靶向杀伤胃癌作用及机制研究背景:寻找在肿瘤中特异性表达的靶点、开发靶向性的RNA干扰(RNAi)载体是当前RNAi治疗研究的两大重要方面;肿瘤干细胞是肿瘤治疗失败的主要原因之一,已成为新的治疗靶点。,,并与胃癌的侵犯深度、淋巴结转移、预后相关,具有较好的靶向治疗意义。因而,,,,进而抑制或杀伤胃癌细胞。方法:,()。1)体外细胞实验:,及对肿瘤细胞增殖、凋亡、细胞衰老、细胞运动/转移等的影响;、p16、Erk、Oct4和Akt等传导通路相关蛋白表达水平的影响。2)体内实验:,观察Bmi—l干扰对体内成瘤的影响;—l干扰对肿瘤细胞衰老的影响;IHC和Westernblot检测相关潜在下游靶蛋白表达明确其体内的调控机制。3);。结果:,明显抑制胃癌细胞的恶性表型和细胞运动、迁移能力,。,胃癌细胞体内成瘤能力明显减弱,。,可能对胃癌干细胞样细胞亦有杀伤作用。、p16及p53通路诱导细胞衰老来杀伤胃癌细胞。结论:、外均可较好地特异性杀伤胃癌细胞,具