枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用机制及研究.pdf

宁夏医科大学硕士学位论文枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究姓名:侯庆宁申请学位级别:硕士专业:内科学指导教师:何兰杰20090401宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要I枸杞多糖对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制研究摘要目的采用高脂高糖饲料喂养8周加小剂量链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)腹腔注射的方法复制2型糖尿病大鼠模型,通过观察中药提取物枸杞多糖(lycium barbarum harides,LBP)对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、骨骼肌组织胰岛素信号分子表达的影响,探讨其改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用及机制,为枸杞多糖治疗2型糖尿病的临床应用提供实验依据,也为进一步认识、研究、开发利用枸杞多糖提供理论依据。方法将100只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(20只)和造模组(80只)2组,并分别给予常规饲料和高脂高糖饲料喂养。8周后,造模组的大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30mg/kg以诱导2型糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠成模后再随机分为5组:糖尿病模型组、高剂量LBP干预组、中剂量LBP干预组、低剂量LBP干预组及二甲双胍(Metformin,Met)干预组。高、中、低剂量LBP干预组及二甲双胍干预组的大鼠每只每日分别予以LBP160mg/kg、80mg/kg、40mg/kg及Met 250mg/kg灌胃(Intragastric,ig),正常对照组及糖尿病模型组的大鼠则每只每日予以等量的蒸馏水灌胃。造模成功时处死正常大鼠及糖尿病大鼠各6只,取血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、TG及TC水平;计算胰岛素敏感指数(insulin sensitive index,ISI)及胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IRI);取胰腺组织行HE染色光镜观察。药物干预6周后,处死所有的动物,取血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、TG、TC、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)及TNF-α水平;取后肢股四头肌组织,免疫组织化学方法检测骨骼肌组织胰岛素受体(Insulin receptor,InsR) 和胰岛素受体底物-1(Insulin receptor substrate,IRS-1)的表达;电子显微镜观察骨骼肌组织超微结构的变化;取胰腺组织行HE染色光镜观察;计算ISI及IRI。结果本实验采用高脂高糖饮食加小剂量STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、血脂、IRI宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要II较正常对照组明显升高,ISI显著降低,胰岛β细胞部分损伤,符合2型糖尿病发病特点及生化特征。糖尿病模型组血糖、IRI、TG、TC、血清FFA及TNF-α水平较正常对照组明显升高(P<,P<),ISI及骨骼肌组织InsR、IRS-1表达水平显著降低(P<,P<),空腹胰岛素水平无统计学差异(P>)。低剂量LBP干预组上述各指标与糖尿病模型组相比均无统计学差异(P>)。中剂量LBP干预组血糖、IRI及TC水平较糖尿病模型组明显降低(P<,P<),ISI及骨骼肌组织InsR、IRS-1表达水平显著升高(P<,P<),空腹胰岛素、TG、血清FFA及TNF-α水平无统计学差异(P>)。高剂量LBP干预组血糖、IRI、TC、及血清FFA水平较糖尿病模型组明显降低(P<,P<),ISI及骨骼肌组织InsR、IRS-1表达水平显著升高(P<,P<),空腹胰岛素、TG及血清TNF-α水平无统计学差异(P>)。二甲双胍干预组血糖、IRI、血清FFA及TNF-α水平较糖尿病模型组明显降低(P<,P<),ISI及骨骼肌组织InsR、IRS-1表达水平显著升高(P<,P<),空腹胰岛素、TG及TC水平无统计学差异(P>)。光镜下,糖尿病模型组大鼠胰岛形态欠规则,胰岛数及岛内分泌细胞数减少,胰岛萎缩,部分细胞空泡变性;低剂量LBP干预组大鼠胰腺病理改变程度仍较重,中剂量LBP干预组、高剂量LBP干预组及二甲双胍干预组大鼠胰腺病理改变程度较糖尿病模型组有所减轻。电镜下,糖尿病模型组大鼠骨骼肌细胞的部分肌原纤维排列紊乱,部分线粒体肿胀、空泡变性,可见嵴断裂、溶解,部分毛细血管内皮细胞肿胀伴管腔狭窄;各药物干预组大鼠骨骼肌超微结构改变的程度较糖尿病模型组有所减轻。结论 1、枸杞多糖能通过提高2型糖尿病大鼠的胰岛素敏感性,实现降低血糖的作用。2、枸杞多糖可能并不通过降低血清TNF-α水平,改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗。3、枸杞多糖可能通过纠正2型糖尿病大鼠脂代