褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响.doc

褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响        [08-01-1416:49:00]    作者:李夏春,王建枝    编辑:studa20【摘要】 目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予50μmol/LMel处理,用免疫荧光检测tau蛋白磷酸化水平,32P特异底物标记技术检测GSK3活性,免疫印迹技术检测PSer9GSK3β和GSK3β的表达水平,计算PSer9GSK3β/GSK3β的比率。结果①CA可在N2awt细胞使tau蛋白在Ser396/404位点和Ser198/202位点过度磷酸化,同时伴有GSK3活性升高和PSer9GSK3β表达水平降低。②Mel对CA引起的tau蛋白过度磷酸化有保护作用;Mel同时对抗CA诱导的GSK3活性升高和PSer9GSK3β表达水平降低。结论Mel可减轻CA引起的tau蛋白过度磷酸化,其机制可能与调节细胞内PSer9GSK3β的表达水平和改变GSK3活性有关。【关键词】 花萼海绵诱癌素;tau;褪黑素;过度磷酸化;阿尔茨海默病 EffectofmelatoninoncalyculinAinducedtauhyperphosphorylation ABSTRACT:Objective Toinvestigatetheinvivoeffectofmelatonin(Mel)oncalyculinA(CA)inducedtauhyperphosphorylationinneuroblastomacells(N2awt).Methods WetreatedN2awtcellswithCAorCAand50μmol/LMel,detectedtheleveloftauphosphorylationwithimmunofluorescence,andassayedtheactivitiesofGSK3andtheratioofGSK3βphosphorylatedatSer9sitetototalGSK paniedwiththeincreasedactivityofGSK3andthedecreasedratioofGSK3βphosphorylatedatSer9sitetototalGSK,theCAinducedtauhyperphosphorylation,GSK3activationandtheratioofGSK3βphosphorylatedatSer9sitetototalGSK MelatoninprotectsneuroblastomacellsfromCA3activityandtheratioofGSK3βph