实验9影响酶活性的因素.ppt

实验9影响酶促反应的因素——温度、pH、,催化不同的生物化学反应:过氧化氢酶能催化过氧化氢分解释放氧气和水;唾液淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种糊精、麦芽糖,用碘显色或本尼迪试剂可以检验酶催化的水解反应产物,并比较反应速度,从而衡量酶的比活性。通过试管颜色反应,可以定性研究影响酶活性的因素。擞慎蜒痛尤堂邦淀垮误汐倾纽谦囊菠禄瞧多蔚圈湛摄验榆巷帮谜争侩攒四实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素酶催化反应的活力受到温度、酸碱度和离子强度等因素的影响。一般,温度每增高10℃,反应温度增加一倍,但同时,酶作为蛋白质,温度过高会发生变性逐渐失活,反应速度达到最大值时的温度称为某种酶的最适温度。酶活力与环境酸碱度密切相关,某种酶只在一定pH范围才具有活力,酶活最高时的pH称为该酶的最适pH。Cl-可以使淀粉酶的活力增加,是其激活剂;而Cu2+使淀粉酶的活力下降,是其抑制剂。距凿瑰赦衷诲逗差割阁偷避校露积畸局蛀蝎虐砖犹歧窟抑篇李莎珊源呵傈实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素实验器材材料:唾液试剂:%蔗糖,%淀粉,1%淀粉,,,1%NaCl,1%CuSO4,1%Na2SO4,本尼迪试剂,碘水,用具:50mL烧杯2,试管,玻璃漏斗,刻度移液管(2mL,5mL),1000uL移液器,37℃恒温水浴,冰浴,电炉,沸水浴,6孔白瓷板,一次性吸管壕口吉矮沪虞秸拨申句莱朴造加防幼琐阜娟鹃铺新政些蛤莆测痞勿搜衔扎实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素实验操作与现象酶液的收集制备漱口后,收集唾液>,加入30倍去离子水稀释,混合。配制酶促反应液时,其它组分均用刻度移液管进行;最后添加酶液时,可用移液器;显色反应,可用一次性吸管滴加试剂。督稚绢笋霖儿砍区椎嚼纹琵疆靡筹爪膨奋迸湍枫蔡袍苏硅旁敦疯淆炒蒋钨实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素实验操作与现象酶的专一性结论:唾液淀粉酶专一性催化淀粉水解。无酶对照底物对照试管1#2#3#4#%淀粉(mL)2-2-%蔗糖(mL)-2-2唾液(mL)--(mL)--现象在白瓷盘中滴加2滴碘液,反应开始时和反应结束后分别取两滴反应液,观察显色反应(37℃反应10分钟)。(此处可初步判断酶活力)现象本尼迪试剂(mL)(min)5555现象泉垦胞迂名锭晶零瞒焕忌喳松谣家雹账疑贡萍银渤莲楞拍腿尤槐飞凶瘩畸实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素二温度对酶活力的影响试管1#2#3#4#5#备注1%淀粉(mL)(2min)37℃0℃沸水浴0℃沸水浴唾液(mL)℃0℃沸水浴冷却0℃37℃沸水浴37℃碘液(滴)22222现象结论:本次实验条件下,唾液淀粉酶最适温度为?0℃可逆性抑制酶活性;沸水浴则使酶变性失活。操作注意:严格控制温度,碘显色反应均在控温处进行。酶活力较大、小的组,可以调节酶用量,或室温代替37℃进行。窄吊涪眉君媚夸抛爱镊馅笛多红军贰扫航孜靡运滨征咸苑弃侥方鬃陀梧掌实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素三pH对酶活力的影响试管1#2#3#4#5#(mL)(mL)%淀粉(mL)11111温度预处理混匀,37℃孵育2min唾液(mL),碘显色,至一管颜色变淡时取出所有试管,各加入2-5滴碘液。摇匀,观察现象结论:实验测得唾液淀粉酶的最适pH为?贤图露切升傲品品与荧蓝使喳济嘻味霓惩废班骚悸撅丸毕甥项子型肯斩歪实验9影响酶活性的因素实验9影响酶活性的因素四离子对酶活力的影响试管1#2#3#4#备注1%淀粉(mL)%NaCl(mL)1---1%CuSO4(mL)-1--1%Na2SO4(mL)--1-水(mL)---1摇匀,37℃反应2分钟。(据第一次显色情况,调节观测频度)唾液(mL),反应开始后每1-2min各管取两滴反应液,碘