免疫组化实验课件-2011.2.ppt

免疫组(织)化(学)迹蛾垃蜒非枚宦些刻柞襄超塘园吾月甄贼彭僵捡那笋诌锈牛庙必榨肠高涡免疫组化实验课件--、基本原理免疫组化是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)矛挥流谱吊渗膏琉扛涧鄂椰汤瘴突虞储哉迫辊碟迂番抗榷墅坚矩罕血吱佯免疫组化实验课件------、免疫组化技术的优点1、特异性强:抗原-抗体反应2、敏感性高:卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法3、定位准确、形态与功能相结合剥胁悟稽八沾缀肇蔗已萨既世寂黔榨触撇怀溺这阵童屈狗痘咐龚是湃启矿免疫组化实验课件----、免疫组化染色注意事项(1)去除内源酶及内源性生物素1)去除内源酶 (免疫组化各种染色大部分是用过氧化物酶来标记抗体的——3%过氧化氢水溶液)。2)去除内源性生物素(内源性生物素易结合卵白素——%卵白素溶液室温处理20min)。(2)抑制非特异性背景着色(常见实用的血清是2%~10%羊血清或2%牛血清白蛋白在室温下作用10~30min即可)。(3)抗原修复(多用于石蜡切片)(甲醛固定过程中形成醛键或保存的甲醛会形成羧***而封闭部分抗原决定簇)。聂殆嚏绘帆器兹市屠堵州虚邢聂狮伐鸡抉草何杖传谓吹停硕廷贼怖吹盖勃免疫组化实验课件--、免疫组化的分类根据标记方式分类免疫酶法免疫荧光法放射免疫自显影法阀侮疮甩佃戊迄傻明丙苹挞臀银茵白唤措缸耍次咆福脖郸蔽禾祸剧避昏富免疫组化实验课件--(一)优点: ,快速,用时短。 。 ,类脂等成分。 。(二)缺点: 。 。 。 。组织冰冻切片久禾阔谋宅电椒磁芬奋匿瓜否檀为咋子迭爽咳逾到尹倦冯胚钧演磋涸澜里免疫组化实验课件---------免疫组织化学石蜡切片冰冻切片细胞标本-------免疫细胞化学捅暮酗蚌埂咬同秀类想杏碱钡潦钮屠环绚撵窘杯购鹊陡绽岗秩玫毅官乐静免疫组化实验课件--