实验和在细胞中的分布.ppt

实验和在细胞中的分布实验原理:DNA主要分布在内,RNA大部分存在于中。***绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的不同,***绿使呈现绿色, 使 呈现红色。利用染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸①能改变→加速染色剂进入细胞②能使染色质中的分离→有利于结合细胞膜的通透性DNA和蛋白质DNA和染色剂细胞核细胞质亲和力DNA吡罗红RNA***绿吡罗红混合目的要求:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法实验材料:人的口腔上皮细胞;洋葱鳞片叶内表皮细胞;1、能否用哺乳动物成熟的红细胞?2、能否用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞??无细胞核避免颜色干扰尽量避免材料上带叶肉组织细胞方法步骤:一、制片2、用消毒牙签刮漱净的口腔内侧壁取口腔上皮细胞后涂NaCl液滴上3、将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯上烘干1、%的NaCl溶液(生理盐水)目的:维持口腔上皮细胞的正常形态思考:如果用植物细胞的话,需要滴加生理盐水吗?目的:将细胞固定在载玻片上注意事项:1、烘烤时要来回移动玻片,以免受热不均炸裂;2、烘烤后,等玻片冷却后再放入盛HCl的烧杯中,以免炸裂。二、水解1、在小烧杯中加入30ml质量分数为8%的HCl,将烘干的载玻片放入小烧杯中;2、再将小烧杯放入盛有30℃温水大烧杯中保温5min。目的:杀死细胞,改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;使染色质中DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂的结合注意事项:时间长,会严重破坏细胞结构,干扰DNA和RNA的观察;时间短,水解不彻底,染液不易进入细胞,染色不充分。三、冲洗取出载玻片,用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒注意事项:冲洗时一定要用缓流,防止细胞被冲走目的:防止HCl与染色剂发生中和作用而影响观察效果四、染色1、将吡罗红***绿染色剂滴2滴于擦干的载玻片上,染色5min2、吸去多余的染色剂,盖上盖玻片(1)先用低倍镜观察,选择染色均匀、颜色浅的区域进行观察(2)换用高倍镜观察,观察细胞核和细胞质的染色情况五、观察实验现象:绿色部分主要集中在细胞核内,红色部分主要集中在细胞质中。实验结论:DNA主要分布在细胞核中,、在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中,将口腔上皮细胞置入8﹪,,有利于蛋白质与染色剂结合2、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中,水解步骤需要的条件是①5%的盐酸②8%的盐酸③10%的盐酸④20℃温水⑤30℃温水⑥40℃温水⑦保温5min⑧保温10minA.①④⑦B.②④⑧C.①⑤⑧D.②⑤⑦3、利用***绿和吡罗红对细胞中的DNA、RNA染色时,***绿,,再加***