中和抗体识别短肽对IFN-α生物学活性的影响.doc

中和抗体识别短肽对IFN-α生物学活性的影响        【摘要】目的研究合成肽WLDPRH的免疫反应性和对干扰素(IFN)诱导的生物学活性的影响。方法根据我们早先的研究,已用中和抗体从噬菌体展示6肽库中筛选出了两个与IFN-α有同源性的肽片段,将其中之一进行了人工合成(WLDPRH),并进行了同源性比较分析,体外竞争酶联免疫吸附实验(ELISA),体外IFN诱导抗病毒和抗增殖分析。结果计算机分析表明,人工合成肽WLDPRH与推理的I型IFN受体结合区LoopAB(29-35位)有相当的同源性。体外竞争ELISA实验表明,合成肽在25μg/ml浓度时能特异性抑制IFN-α与中和抗体4C1结合。体外抗病毒结果显示,干扰素在亚保护剂量时(20~70pg/ml)时,合成肽能提高IFN-α作用细胞后的抗病毒活性,,IFN-α抗病毒保护率从40%提高到86%,为最高保护率的最低剂量,,IFN浓度为5~55ng/ml时,对IFN-α诱导的抗增殖作用不明显。结论用中和抗体筛选的短肽WLDPRH能影响IFN分子作用模式,并且有可能模拟IFN分子LoopAB的结构和功能,这为免疫治疗及IFN的小分子模拟设计奠定基础。【主题词】合成肽干扰素中和抗体InfluenceofthesyntheticpeptiderecognizedbyneutralizingantibodyonIFN-inducedbiologicalresponses HURong,MAXuejun,WEIKaikun,,Beijing100052 【Abstract】 Objective TheinfluenceofsyntheticpeptideWLDPRHonIFN- Basedonourearlierstudiesinwhichtwopeptideswererecognizedbyneutralizingantibodyfromthehexapeptidelibrarydisplayedonthephage,oneofthepeptidessynthesized,-buildingapproachshowedthatthesyntheticpeptideWLDPRHexhibitedstructuralhomologywithLoopAB(29-35),,thesyntheticpeptideWLDPRHin25μg/-inducedantiviralassayshowedthattheprotectiveeffectsofsuboptimaldose(20-70pg/ml)ofIFNwereincreasedfrom40%to86%