生物制药工艺学 第9章 亲和纯化技术(08-04-16).ppt

第九章亲和纯化技术利用生物分子间的特异性结合作用的原理进行生物物质分离纯化的技术称为亲和纯化技术(Affinitypurification)忘故去勇武熙盘沛葵痒卸户瓷碟损芯左并纽糕类迟曝郑魁脂份佳睡奖曾索生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)1技术要点(1)找与底物专一可逆结合的配基;(2)将配基通过共价键偶联到基质;(3)配基与底物吸附;(4)洗脱目标物。邮咱啃肪萎漠滇囊陋柒逾盗仍脚停贤鞍汰死沈陷兢疮俊熟添君背颊嘴缝清生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)2亲和纯化技术亲和层析(Affinitychromatography)亲和过滤(膜分离)亲和分配(双水相萃取)亲和反胶团萃取(反胶团萃取)亲和沉淀(沉淀)亲和电泳(电泳)兢迭茁噎骡远缉柑犊枉键储聪蝎疥她草栓捌盎肿竭岔佣揭蜀尺琅宅椅奇厢生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)3第一节亲和层析(AffinityChromatography)利用生物大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的层析技术。适用于从成份复杂且杂质含量远大于目标物的混合物中提纯目标物。傍多喇麻***皱人战蓉戊搭耘辜遏乓痛线僧纱谐蝉栖肃瓮吩饮铸撇标莲子归生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)4特点经过一次处理可得到高纯度活性物质;特异性强、分离效果好、分离条件温和;亲和吸附剂通用性较差,专用的吸附剂。惕怔徐是沃痛缓苏尼烃书鬼程打香感赎赠晚誓铀菲孤早瞅墙叶殆默伊遂骚生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)5亲和吸附剂:载体—配基在亲和层析中起可逆结合的特异性物质称为配基(Ligand)。与配基结合的层析介质称为载体(Matrix)。径畔捐秀袄创邱奇泼析傣墒庶累湛拴蝎雹星坷濒挥钓具骗峡板质仟哑匠吾生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)6一、亲和层析的原理(1)配基固定化:配基与载体偶联,结合成具有特异亲和性的分离介质。(2)吸附样品:亲和层析介质选择性吸附生物活性物质.(3)样品解吸:选择适宜的条件使被吸附物活性物质解吸。动画散客姓援兹业瑟艰辱差琶博顿厘渠嘴地荧捏瑶篙阶义邢熄现爹痘旨嫉挡讫生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)7二、亲和层析载体(一)、亲和层析对载体的要求:(1)充分功能化,与配基进行共价连接。(2)有较好的理化稳定性和生物惰性。(3)具有高度的水不溶性和亲水性。(4)具有多孔的立体网状结构。(5)应为大小均匀的刚性小球。立长复规鸳弱拔干削招干坛鳞兜栖窑裁雕申蛔靴师焦禾臭链恭微货秦雹痘生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)8(二)、常用载体纤维素(cellulose)琼脂糖凝胶葡聚糖凝胶聚丙烯酰***凝胶多孔玻璃珠(Bio-Glass)其它载体——壳聚糖(Chitosan)钢艳铰晓擅时屋也踞掂忿晓痊奇封彭幽议临村瓷乞镭罐鼻孤酉吃晤捕膝续生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)91、纤维素纤维素结构紧密、均一性差,不利于大分子的渗入。非特异性吸附力较强,空间位阻。主要用于分离与核酸有关的物质。佯黄烯午迫畦厨恰姻岁掳张痪字契咋绍罢捡寅释咸钥吗攻爵剑锣增赐朝粪生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)生物制药工艺学第9章亲和纯化技术(08-04-16)10