裸鼠成瘤的一些个人经验.doc

裸鼠成瘤的一些个人经验.doc动物实验杂七杂八的做了不少,分享一下目前做的裸鼠成瘤的一些经验,希望和大家相互交流一下,旨在提高一下自己关于这个方面的技能。本人完全是自己根据一些文献,自己摸索,摸着石头过河做的,没得正规的导师知指导,苦~本人联系方:(之前本来留个小企鹅的,结果表示文库给我一直都是提交中,苦~望大家在评论中交流哈~),希望大家有好的意见和建议,多多交流一下啊!下面开始正题:实验环境:也就是裸鼠饲养环境,由于条件限制,所饲养的裸鼠均为普通级,当然购买的肯定是SPF级哈。最开始饲养的时候,很担心,因为裸鼠免疫缺陷,会不会动不动就挂了呢!在丁香园不断活跃了一翻。最后根据实际情况总结了一翻目前裸鼠饲养的条件:首先,裸鼠必须和大小鼠分开,哪怕只是单独的隔一个屏风,大小鼠很容易传染鼠肝炎给裸鼠,裸鼠一旦得了这个病,死是必然的了(当然前提是不会医治哈,若能医疗就另当别论了)。这个病的症状就是:裸鼠皮肤很红,弓背,越来越瘦瘦的成了皮包骨头了。当你发现这个情况出现后,请及时处理掉,不然的话所有的裸鼠都会慢慢得这个病(亲身经历,惨不忍睹啊~)其次,裸鼠饲养的垫料,当然是要无菌垫料啦,这个应该不难吧,至少一般的高校动物中心都可以购买的啦~如果确实没的这个,可以使用卫生纸作为垫料,前提需要很勤的更换,普通的无菌垫料(松木花什么的)一般来说可以3-5天换一次,用纸的话就得几乎1-2天换了,太麻烦啦~再者,饲料和水源的问题,饲料采用无菌饲料这个全国各地都有买的。水源很重要,至少等级为纯净水(就是办公司喝的那种),我现在用的是纯水仪进化的水,嘻嘻~。关于水里面是否加抗生素的问题,本人表示最开始加了一下什么青霉素链霉素等等,该死的还是死,后来不再加了,一样没有问题,主要是饲养环境好就行。晒一晒我自己的山寨版本的饲养条件:普通储物箱(就是超市里面经常卖的),一个独立的房间,纯水,无菌垫料和饲料。OK啦~,到目前位置,饲养的裸鼠没有再死掉啦~另外关于饲养时间的问题:网上流传的大部分是饲养4个月就不行了~,嗯嗯,本人饲养的一般来说也就3-4个月,但是基本上没有出现问题现在。另外,如果发现裸鼠身上发白,很明显的白灰的话,可以用酒精棉球全身擦拭,一般来说可以控制这个情况。另外:代养在动物中心的请无视这个!!!!裸鼠皮下成瘤:首先你要确定你的细胞能否成瘤,或者说成瘤效果好不好!这个一定要多查查文献,本人就有不堪回首的经历,使用的细胞基本上没人说过可以成瘤,成瘤了数次均已失败告终,即时有白色的节点,也无法成型,1、2周就消失了。其次,一般来说细胞接种的量1*107/,或者浓缩为1*107/。有的细胞很容易成瘤的话就不必要考虑这么多了,根据个人经验,HEPG-2类,A375类等一些肿瘤类细胞很好成瘤,基本上是100%,我用的是T25培养瓶养满了(80%)可以打2针都能完全成瘤,妥妥的!当然,我这个只是要求成瘤了就可以,不用管其他的哈!再者接种的部位,根据个人经验,背部、腋下、颈部均可以,当然腋下和颈部效果最好的啦!接种方法(摘抄):皮下肿瘤模型中,想要成瘤率高就接种在腋下。接种时由裸鼠体侧腰部稍靠上的部位进针,要保证与接种点的距离小于针头的长度,向头部方穿行,绝对不能刺破皮肤或者刺破肌肉层,当针头到达接种位点时注射,退出针头,这样操作的目的并不完全是避免漏液,其实熟练后,不需要皮下穿