实验三 种子发芽测定.doc

实验三种子发芽测定一、目的要求要求掌握种子发芽测定的操作技术,并学会计算种子发芽的各种质量指标。二、 柠条种子。 恒温箱、培养皿、滤纸、镊子、温度计(0~100℃)、取样匙、直尺、量筒、烧杯、高锰酸钾、标签、蒸馏水、洗瓶、解剖刀、解剖针等。三、 发芽测定所需样品从净度测定选出的纯净种子中提取。用四分法将种子分成4份,从每份中随机提取25粒种子组成100粒。共取4个100粒,即成为4次重复。种粒大的可以50粒或25粒为一次重复,样品数量有限或设备条件不足时,也可以采用3次重复,但应在检验证中注明。 为了预防霉菌感染,干扰检验结果,检验所使用的种子和各种物件一般都要经过消毒灭菌处理。① 检验用具的消毒灭茵:培养皿、纱布、小镊子仔细洗净,并用沸水煮5~10min。② 种子的消毒灭菌:目前常用的有福尔马林、高锰酸钾、升***、过氧化氢等。药剂种类不同,处理的方法和时间也不一致。~%的高锰酸钾溶液浸2h,取出用清水冲洗数次。,然后用室温水浸种24h,浸种过程中更换1~2次水。 将经过消毒灭菌、浸种的种子安放到发芽床上。视树种而不同,常用的发芽床有纱布、滤纸或细砂。一般中粒、小粒种可在培养皿中放上纱布或滤纸作床。本次实验均以滤纸为发芽床。在每个培养皿床上整齐地安放100粒种子(种粒较大的可为50粒乃至25粒),种粒之同保持的距离大约相当于种粒本身的1~4倍,以减少霉菌蔓延感染,并避免发芽的幼根相互纠缠。种粒的排放应有一定规则,以便计数并减少错误。在培养皿不易磨损的地方(例如底盘的外缘)贴上小标签,写明送检样品号、重复号、姓名和置床日,以免错乱。然后将培养皿盖好放入指定的恒温箱内。恒温箱定期进行臭氧消毒。根据树种的特性使用变温或恒温,柠条和胡枝子种子适宜的发芽温度为20~30℃。规定使用变温的,每昼夜应当保持低温16h,高温8h,温度的变换应在3h以内逐渐完成。湿度为60~70%。(1)经常检查发芽环境的温度,仪器的温度同预定的温度相差不能超过±1℃。(2)保持发芽床的水分 水分不足时应及时加水。但水分也不能过多,用指尖轻压发芽床(指纸床),如指尖周围出现水膜,或者种粒四周出现水膜,都表示水分过多。(3)通气 种子发芽需要足够的氧气,并会释放出大量的二气化碳。有盖的培养皿的缺点之一就是通气不良,应当经常揭开盖子充分换气。(4)将轻微感染霉菌的种子取出(不要使它们触及健康的种粒),用清水冲洗数次,直到水无混浊再放回发芽床。发霉严重时整个滤纸,甚至整个培养皿都要更换。这些情况在发芽记录表中应有记录。(1)发芽测定的情况要定期观察并按表内容记载。为了更好地掌握发芽测定的全过程,本实验最好要求每天作一次观察记载。尤其是统计发芽势和发芽率的那一天,必须有记载。记载时拣出正常发芽粒、腐坏粒和异状发芽粒。(2)发芽测定的持续时间 刺槐种子发芽测定的持续天数为14d,以置床之日为零起算,且不包括种子预处理的时间。如果确认某样品已经达到最高发芽率,也可在规定的时间以前结束测定。如到规定的结束时间仍有较多的种粒萌发,也可酌情延长测定时间。发芽测定所用的实际天数应在检验