动物细胞工程.ppt

动物细胞工程.ppt如何治疗烧伤?对烧伤患者来说,真皮移植类似拆东墙补西墙———医生需要从他们身体其他部位取下一块完好的皮肤,重新植入烧伤部位。尽管能治愈创面,但在取皮部位却留下了新的创伤,常常导致疤痕增生,甚至因取皮过深,供皮区难以自愈,形成水疱,反复溃疡,导致“好了旧伤又添新疤”。遇到大面积严重烧伤的病人,如果其正常皮肤所剩无几,缺乏自体皮源及时封闭创面,常常引起创面及全身严重的感染等一系列并发症,有可能危机生命。因此,国际医学界一直试图在体外制造一种皮肤代用品,用来更换人体损坏的皮肤组织。皮肤移植人造皮肤人造皮肤是采用工程学和细胞生物学原理方法,在体外重建具有生物学活性的皮肤类似物,用来修复、替代缺损的皮肤组织。只需指甲大小的人类皮肤组织,便可培养出数亿倍的“活性皮肤”,10天可以培养完成,可避免排斥反应。我国“人造皮肤”已经开始临床试验。:动物细胞培养(基础)动物细胞核移植动物细胞融合生产单克隆抗体一、:动物细胞培养就是从动物的机体中取出相关的组织,将他们分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。:1)通常应取哪些组织?为什么?2)为什么要用胰蛋白酶处理?胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?用胃蛋白酶行吗?3)什么是细胞贴壁和接触抑制?4)什么是原代培养和传代培养?5)细胞培养一般培养几代?为什么?动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系剪碎胰蛋白酶处理培养液培养细胞贴壁、:取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的原因?因为成块组织不利培养,要用胰蛋白酶消化细胞间的蛋白质分散细胞。胰蛋白酶长时间作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。-,此环境下胃蛋白酶()没有活性,而胰蛋白酶(-)的活性较高。幼龄比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。②为什么要用胰蛋白酶处理?胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?用胃蛋白酶行吗?原代培养指将动物组织消化后初次培养的过程。指培养的第1-10代以内的细胞。传代培养指将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理后,。要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒、易于贴附。接触抑制指贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂的现象。③什么是细胞贴壁和接触抑制?④什么是原代培养和传代培养?细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40-50代,这种传代细胞称为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞株遗传物质未改变;细胞系遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。3、动物细胞培养的条件①无菌、无毒环境②营养③温度和pH④气体环境培养液和所有培养用具进行无菌处理;培养液中加抗生素;定期更换培养液。培养液的化学组成:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,此外通常还需添加血清、血浆等。±℃为宜,-%空气+5%的CO2O2是细胞代谢所必需的;CO2的主要作用是维持培养液的pH