神经营养因子和生长因子等对培养的成人视网膜神经细胞的影响_刘文文.pdf

#论著#基金项目:国家自然科学基金资助项目(39770242)作者单位:200080上海交通大学附属第一人民医院中心实验室通讯作者:黄倩,Email:******@=摘要>目的探讨成人视网膜神经细胞体外培养条件,脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素(NT-4)、表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、诱导分化因子全反式视黄酸(RA)等对成人视网膜神经细胞生长、增殖、凋亡的影响及调控机制。方法胰蛋白酶消化结合机械吹打分离成人视网膜神经细胞,在培养基中加入或不加入BDNF、NT-4、EGF、FGF、RA。根据细胞形态、生长方式及免疫细胞化学特征确定细胞类型。比较各组中神经元的数目、转录调控因子c-fos、c-jun及细胞凋亡调控因子Bc-l2、Bax表达水平。结果与对照组相比,BDNF、FGF处理组存活的神经元特异性烯醇酶、-l2、c-fos及c-jun表达阳性细胞数也增多(均P<0101),培养的视网膜神经细胞在体外存活时间可长达8个月;RA处理组c-fos、c-jun阳性细胞数较对照组增多(均P<0101);而NT-4、EGF处理组各项指标与对照组比较,差异无显著意义(均P>0105)。结论BDNF、FGF、RA能显著提高体外培养的成人视网膜神经细胞的存活,其机制可能涉及上调转录调控因子c-fos、c-jun及凋亡抑制因子Bc-l2的表达,或下调凋亡促进因子Bax的表达。但EGF、NT-4对体外培养的视网膜神经细胞存活状态无明显改善作用。=关键词>视网膜;神经元;细胞培养;神经生长因子类;内皮生长因子;成纤维细胞生长因子EffectofneurotrophicfactorsandgrowthfactorsonadulthumanretinalcellsinvitroLIUWen-wen,XUPing,HUANGQian1CentralLaboratory,TheFirstPeoplecsHospitalofShanghai1ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200080,ChinaCorrespondingauthor:HUANGQian,Email:huangq@=Abstract>ObjectiveToexaminewhetheradulthumanretinalcellscanbemaintainedinvitrooverlongtimeperiodsandtostudytheeffectsofbrain-derivedneurotrophicfactor(BDNF),neurotrophin-4(NT-4),epidermalgrowthfactor(EGF),fibroblastgrowthfactor(FGF),andretinoicacid(RA)ongrowth,proliferation,andapoptosisoftheculturedadulthumanretinalcells1MethodsAdultretinalcellswereisolatedfromdonoreyesandcultured1BDNF,NT-4,EGF,FGF,riteria,growthpatt