HPLC法测定牛磺熊去氧胆酸含量.doc

HPLC法测定牛磺熊去氧胆酸含量摘要,目的采用反相高效液相色谱法测定牛磺熊去氧胆酸的含量。方法用WelchromC18,250mm×,5μm,柱为分析柱,乙***,缓冲液,磷酸二氢钾与庚烷磺酸钠混合溶液,,37,63,V/V,为流动相,检测波长为210nm。,定量限为1ng,,,r=,,%。结论本方法准确、简便,可用于测定牛磺熊去氧胆酸的含量。关键词,牛磺熊去氧胆酸含量牛磺鹅去氧胆酸牛磺熊去氧胆酸,TauroursodeoxycholicAcid,,是最新的第三代口服胆汁酸,是熊去氧胆酸与牛磺酸的共轭体,其亲水性较熊去氧胆酸高,溶石速度更快,全部溶解率提高,安全性更好。其含量测定方法多采用酸碱滴定法,但误差较大,文献报道中也有采用HPLC法测定含量的,但基本上都是采用甲醇与磷酸盐的混合溶液作为流动相,该方法存在重现性不够好且峰形较差的缺点,我们通过实验,对检测方法进行改进,获得了较好的效果。1、仪器及试药日本岛津LC-10A液相色谱仪,SPD-10AVPPlusUV-VIS检测器,,TU-1800SPC紫外分光光度计,北京普析1通用仪器公司,。磷酸二氧钾、庚烷磺酸钠、盐酸、氢氧化钠、双氧水等均为AR级,甲醇为色谱级。牛磺熊去氧胆酸钠对照品,中国药品生物制品检定所,批号110816-200507,含量100%,供含量测定用,,牛磺熊去氧胆酸工作对照品,本公司提供TAU091229,,牛磺熊去氧胆酸样品,本公司提供TAU091222,TAU091223,TAU091228,,牛磺熊去氧胆酸,东京化成工业株式会社,试药,,,牛磺鹅去氧胆酸对照品,中国药品生物制品检定所,批号110846-200405,。2、,WelchromC18,250mm×,5μm,柱为分析柱,乙***,缓冲液,,,加水至500ml,混匀,=37,63,V/V,为流动相,检测波长为210nm。,发现其只有末端吸收,仪器噪音水平高,灵敏度较低,为了保证检测灵敏度同时避免噪声的干扰,选择210nm为检测波长。采用乙***,缓冲液,,,2加水至500ml,混匀,=37,63,V/V,为流动相,出峰时间合适,峰形好。,图1,A牛磺熊去氧胆酸钠,中检所,B牛磺熊去氧胆酸,日本,C牛磺熊去氧胆酸工作对照品D牛磺鹅去氧胆酸,中检所,,加流动相稀释至刻度,作为贮备液备用。,?水浴上反应2hrs后,,加流动相至刻度,即得。主峰能与杂质及降解产物完全分离。,,于80?水浴上反应2hrs后,,加流动相至刻度,即得。主峰能与杂质及降解产物完全分离。