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[修订]溶菌酶在医药方面的应用溶菌酶在医药方面的应用一、溶菌酶简介溶菌酶(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramideglycanohydrlase),是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键,使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合,与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐,使病毒失活。因此,该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。溶菌酶(也称溶解酶),它能够通过催化肽聚糖中N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖残基间和壳糊精中N-乙酰葡糖***残基间的1,4-β链的水解,而破坏细菌的细胞壁。在人体中,溶菌酶在细胞分泌液,如唾液、眼泪以及其他一些体液中广泛存在;也存在于线粒体中的细胞质颗粒体中。此外,蛋清中也有大量的溶菌酶。溶菌酶因能够专一的作用于目的微生物的细胞壁的盐基水解蛋白酶,被广泛的运用于食品、饲料、医药等行业。本文主要介绍溶菌酶在医药方面的应用,并展望了其发展及应用前景。二、溶菌酶的来源及提取方法1、溶菌酶来源溶菌酶广泛存在于家禽、鸟类的蛋清和哺乳动物的泪液、唾液、血浆、尿、乳汁、白细胞及其他体液(如淋液)和组织(如肝、肾)细胞内;从大麦、芜青、无花果、木瓜和卷心菜、萝卜等植物中也能分离出溶菌酶,其中以蛋清中含量为最高(约含0(3,)。而人乳、眼泪、唾液中的溶菌酶活性远高于蛋清中(约为3倍)或其他来源的溶菌酶的活性。鸡蛋清中的溶菌酶是动物溶菌酶的典型代表,是溶菌酶群中重要的研究对象,也是目前了解最清楚的溶菌酶之一。在哺乳动物的乳汁中,人乳汁中的溶菌酶含量是牛乳的3000倍[31。按来源不同,可将溶菌酶分为蛋清溶菌酶、动物溶菌酶、植物溶菌酶、微生物产生的溶菌酶和细菌噬菌体产生的溶菌酶;按作用细胞壁不同,可将溶菌酶分为细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。2、溶菌酶的提取方法2(1直接结晶法此法操作简单,成本低,但不能用以分离微量的溶菌酶。2(2离子交换层析法此法具有简便、高效、成本低,且可自动化连续操作的优点圈。2(3亲和层析亲和层析法分离纯化的倍数较高、质量较好,且可广泛应用于各种来源的溶菌酶,用于浓缩和精制微量的溶菌酶。但是由于亲和吸附剂的制作较复杂,限制了其在工业上的大规模利用。2(4超滤与亲和层析结合超滤与亲和层析结合提取溶菌酶,是近年来开发的新方法。首先用超滤除去大部分杂蛋白,保留溶菌酶,此时溶菌酶还较粗,再用亲和层析法得到精制产品。2(5膜色谱技术(亲和膜色谱,离子交换膜色谱)20世纪80年代末,出现了亲和膜色谱技术。该技术兼具膜分离与亲和分离的特点。与传统的膜分离、亲和色谱相比,膜色谱技术不仅具有纯化倍数高、压降小、分离时间短、生物大分子在分离过程中变性概率小,以及允许较快的加料速度等特点,而且比柱亲和色谱更易实现规模化生产。2(6超滤与传统的生化分离技术相比,超滤技术主要的优点是产品的高产出量。然而尽管超滤技术在反渗析及浓缩等过程中得到广泛的应用,但是作为在生物工业领域中潜能很大的一种蛋白质分离技术,超滤仍未被充分利用。2(7反胶团提取反胶团萃取是近年发展起来的一种新的萃取方法,它是利用有机溶剂中加入