山羊卵子受精及原核期胚脆质成分的微细胞结构研究.doc

,哈尔滨150D3D)摘要本研究用光镜和电镜观察刊山羊卵子受精l5,,,,,,滑面内质网,,对于揭开个体发育的奥秘,提高动物繁殖率和控制生育,,,体外受精卵往往发育受阻,其主要原因是受精异常所致在人类,人们已成功地应用超微结构的方法来检查体外受精卵正常与否,井以其作标准来判断一批体外受精卵或一种培养方法是否可用….此法当然也可用于家畜体外受精卵的检查,但目前对家畜正常体内受精的超微结构研究资料尚少】,】.尽管多精受精会导致发育中断,但许多动物的多精受精卵仍可发育到桑椹胚…,,确立各种动物正常受精卵原核期的超微结构,并以其为标准判断体外受精卵的正常与否,,进行基因导入和细胞核移植都得利用原核期受精卵,,,用国产卵泡刺激素(FSH)和前列腺素(PGF:),每天2次注射FSH,连续4天(第1天每次3mg,,第3天每次2mg,).在注射FSH第3天的早晨,,,,用含1O%%成二醛中固定1小时,PBS洗2次后,,后固定1小时,,照像后,,,】,,均位于输卵管上鼹;作相差镜瑰寮舸4个卵子,其中有2个在卵周隙内有第一和第二极体(图1);1个在卵周隙内有1个穿人的精子;另一个透明带表面虽附有精子,,即两个有第二极体的卵子均有原核形成,其他两个卵子形成许多大小不等的小泡,泡间释出顶体内容物(图8).进入透明带内的多余精子,均位于透明带外层,无一位于内层的(图6).进入透明带的精子都已发生过顶体反应,可见到顶体反应后残存的小泡位于透明带表面上(图6).在穿人精子的周围和前方,可见到由顶体素溶解透明带物质产生的通道(图6).三,原核期,原核期卵子的雌雄原核形态相似,棱睦清晰,核质均匀,(图2).原核期卵子表面上有很多微绒毛(图9)绝大部分质膜卞的皮质颗粒都已擗出,,微绒毛较少(围3).皮质医的主要细胞器是线粒体,其形卷仍为带帽样(图5),,,可见到高尔基复台体,,一种是以平行排列的扁平囊为主的典型高尔基复合体(图10);另一种是以小泡j为主的不典型高尔基复合体(圈4).滑面内质网主要由扁平囊组成,(图7)[1”证明,自然交配山羊拌卵16小时,%的卵子剐有精子穿人,,有58处在原核期,17精子穿人卵周隙