岩黄连氯仿萃取部位化学成分研究.doc

2009-2010学年第二学期短学期实验报告岩黄连***仿萃取部位化学成分研究岩黄连***仿萃取部位化学成分研究1、实验目的与原理 中草药岩黄连有很多药用价值,因此提取分离其成分有重要的意义。利用萃取、柱层析、薄层层析、重结晶等化学手段达到分离的目的,并对分离的成分进行点测定和光谱测定。2、实验材料 (1)实验主要仪器RE-52A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、TU-1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)型号:TU-1901、富立叶变换红外光谱仪(科学仪器部)型号:MAGNA-IR550Ⅱ型4000-400㎝-1、ZK-82真空干燥箱(上海实验仪器总厂)、X-4数字显微熔点仪(未校正)(北京泰克仪器有限公司)、层析柱(D=㎝、D=㎝)桃形分液漏斗(500ml)、圆底烧瓶(10L)、电热套(浙江海宁新华医疗器械厂)    (2)试剂柱层析硅胶(粒度:200-300目、青岛海洋化工分厂)、薄层硅胶G、95%乙醇、石油醚(30-60°)、***仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇、***等试剂均为分析纯(天津市化学试剂批发公司)、显色剂为10%浓硫酸醇溶液。3、%㎏研磨至粉碎,加入10L的圆底烧瓶中,95%乙醇的加入量约为瓶体积的2/3,并浸没药材,每次加热回流1-2个小时,共提取4次,提取液由最初的黑色变为浅棕色,合并提取液,经旋转蒸发仪浓缩得浸膏约300g。%乙醇提取物的萃取阶段将浸膏悬溶于水,依次用石油醚、***仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,其中***仿萃取部位,萃取液最初的黑色浑浊液体变为淡黄色透明液体,合并萃取液,经旋转蒸发仪浓缩得***仿萃取物约60g。:将浸膏经6mol/ml的盐酸酸水转溶并调PH值为2~3,用Na2CO3碱化调PH值为9,得到含沉淀的溶液,过滤,弃去母液,将沉淀用***仿萃取,过滤的***仿萃取液,用旋转蒸发仪浓缩得到总生物碱,但是本次实验将浸膏中的化学成分依极性大小分段,直接进行硅胶梯度柱层析分离。:将上述制得的***仿萃取物用***仿溶解,按质量比1︰1加入层析用硅胶拌匀,悬蒸挥干溶剂成固体溶液。,采用干法装柱,水泵抽气以平衡柱体,然后将上述处理过的样品缓缓加入硅胶柱,边装边轻轻敲打柱体,以使样品均匀平整地铺在硅胶上面,并加脱脂棉,防止加淋洗剂时冲刷样品,使其表面不平(为使硅胶不漏出,在柱底端也应加入脱脂棉)。首先用***仿洗脱,然后以***仿︰甲醇进行梯度洗脱,收集各馏分,每馏分500ml,并用旋转蒸发仪浓缩后经TLC检验,根据其表现合并相同馏分浓缩液,自然挥发,将其抽滤并用溶剂洗涤得到几个不同组分。第2个馏分部位Fr7-8(洗脱比例***仿=1)无色液体,旋蒸有少量淡粉色晶体析出,以***仿进行重结晶,得到化合物A,实验编号为1,。由于只有化合物A经TLC检验为单点,所以只对样品进行第二次硅胶柱层析,并对化合物进行表征。,经TLC检验以探索合适的展开剂(乙酸乙酯︰甲醇=5:1)乙酸乙酯︰甲醇=5:,并超声10分钟以赶走气泡,在柱