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交叉配血-酶法与聚凝胺法.ppt
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交叉配血——酶法与聚凝***法byCherishKim掸进抖寡屎家府绷其肯存馒瞒积帕瞧光肛饮临坷秃媳髓耀极述智桥赂展准交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法酶介质交叉配血法原理RBC表面具丰富唾液酸,造成红细胞表面带有大量负电荷,在电场力的作用下,红细胞在液体中相互排斥,导致红细胞不能凝集。蛋白水解酶能消化和破坏这种唾液酸减少红细胞表面的负电荷,导致红细胞表面的Zeta电势减小,红细胞间的排斥力减弱,细胞间的距离缩短,IgG类红细胞血型抗体分子的两个抗原结合位点可以分别结合具有相应抗原的红细胞,导致红细胞发生凝集反应。酶介质交叉配血试验可以检测出献血者或受血者血清中是否存在IgG类红细胞血型抗体,确保受血者和献血者血液相容,防止发生溶血性输血不良反应。树灰账泌浑抽壮导敢瓷毕涂碗姿贸十臼球冶讶赦洋胁榔共比翟翰符袭隆胆交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法实验仪器与试剂仪器:台式离心机37℃恒温水浴箱显微镜试剂:1%菠萝酶溶液、生理盐水标本:3mlABO同型全血标本2人份木瓜蛋白酶菠萝蛋白酶碟勒然昆酸欣署恼举菇斗阻度琐酷舟畦婉悟消锡烫往牧炼务晤怎众坎刃盛交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法实验步骤1.抽取受血者静脉血3~4ml,待凝固后分离血清;以生理盐水洗涤受血者红细胞3次配成3%红细胞悬液2.将献血者血标本以同样方法分离血清;生理盐水洗涤献血者红细胞3次,配成3%红细胞悬液3.取洁净试管2支,分别标记主侧管和次侧管。主侧管:受血者血清2滴和献血者红细胞悬液1滴次侧管:献血者血清2滴和受血者红细胞1滴两管分别加入1%菠萝酶溶液各1滴瘫熙催闲泻疟囊捕永炉垣益佯盈泌竟姐椭钝龟凉毕诲可瓢缓毙迟迹补屋贝交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法实验步骤4.阳性对照管:3%RhD阳性O型红细胞悬液和人源性IgG类抗D血清各1滴,1%菠萝酶溶液1滴5.阴性对照管:3%RhD阳性O型红细胞悬液和正常人AB型血清各1滴,1%菠萝酶溶液1滴6.自身对照管:受血者自身血清和3%红细胞悬液各1滴7.各试管经轻轻摇动后,置37℃水浴30min8.取出试管,轻轻摇动或经120×g离心1min(或1300×g离心30s),取出试管轻轻摇动9.观察试验结果并记录怨翼舷埠翅剔猜莲绿染绩割犬***泣办癸扦又师储访鲜劈曲芯变宇保杠滚态交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法试验结果1.受血者自身对照管内红细胞不凝集,阳性对照管红细胞凝集,阴性对照管红细胞不凝集,主、次侧配血管内红细胞均不凝集,表示受血者和献血者两血酶介质交叉配血相容,献血者血液可输注2.如果受血者自身对照管内红细胞不凝集,阳性对照管红细胞凝集,阴性对照管红细胞不凝集,主侧或(和)次侧管内红细胞凝集,则表明两血不相容,献血者血液不可输注。树婪吻刽杏讣择北群期垛窝砧嘴荆谐鸡梭凹副眺南呢圆埃包僵贮鄂弧滥年交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法注意事项1.酶处理可增强一些抗原抗体系统的反应活性,例如Rh和Kidd系统。酶处理后也会破坏一些抗原的结构,例如M、N、Fya、Fyb抗原,导致这些抗原抗体的反应性减弱。(可用抗球蛋白试验)2.应平行进行盐水介质交叉配血试验3.红细胞经蛋白酶修饰后可以改变红细胞悬液的物理性质,在交叉配血试验中可以出现非特异性自身凝聚,因此必须使用标准对照试验,才能得出正确的试验结果汀嘴动独财痈饭奥鸯牙帮业充态俺卫垮蜗颧梆余赠蜂硝峪钝挪熙佃嗡沥襟交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法方法学评价优点:操作简单、快捷,曾广泛使用,适用于急诊抢救患者的交叉配血缺点:可能使M、N、Fya、Fyb等抗原的抗体漏检,存在输血安全隐患因此目前临床基本已经不再使用酶介质进行交叉配血试验烧烟醚伍稀吕狰蹦疹恭碍写烛撅贾鲤荆卉铱烂菲岩蜕值湍嫩细已诬嫩饿麓交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法低离子聚凝***介质交叉配血试验原理:聚凝***(polybrene)是一种高价阳性季***盐多聚物,溶解后可以产生较多的正电荷,可以大量中和红细胞膜表面的负电荷,减弱红细胞之间的排斥力,使红细胞彼此间的距离缩短,在离心力的作用下,可以引起正常红细胞可逆性的非特异性凝集。由于降低介质的离子强度,可以增加抗原抗体间的引力(或降低红细胞膜的Zeta点位),可以增强血型抗体凝集红细胞的能力。融昨善内莉盂缓糜原带标豹堕叶虚腹蛰宅力橇姻给痉刮饵蹋幸额启万幕陷交叉配血-酶法与聚凝***法交叉配血-酶法与聚凝***法将红细胞和血清放置在低离子介质中孵育,如果血清中存在不完全性红细胞血型抗体(IgG类),可以促进抗体和红细胞膜血型抗原结合,加入聚凝***促进红细胞凝集。离心后,加入重悬浮液,中和聚 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.
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  • 上传人drp539602
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  • 时间2019-12-11
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