W2101-4 样品前处理-酶联免疫法快速检测饲料中黄曲霉毒素总量-微教材.docx

《农产品质量安全检测技术》课程-微教材微课编号W2101微课名称样品前处理-酶联免疫法快速检测饲料中黄曲霉***总量所属模块生物安全快速检测子模块真菌***的快速检测关键词饲料;黄曲霉***总量;快速检测是否通用通用√农产品食品是否重点建设√是否微课类型实验实训型微课形式实地拍摄式微课类型实验实训型教学目标掌握黄曲霉***总量快速检测中的相关溶液配制方法掌握黄曲霉***总量快速检测的样品前处理方法教学内容知识点技能点黄曲霉***总量快速检测中的相关溶液配制黄曲霉***总量快速检测的样品前处理1、 掌握黄曲霉***总量快速检测中的相关溶液配制操作技术2、 掌握黄曲霉***总量快速检测的样品前处理操作技术知识讲解1、样品前处理的作用无论是对样品的化学分析还是在生物工程中,样品的提取、分离、纯化都是必不可少的前处理步骤。样品前处理的好坏将直接影响最后的结果,不同的检测手段对样品前处理的要求也不相同。其主要目的大都在于:(1)、将目标化合物从基质中分离出来;(2)、尽可能地除去对目标化合物的分析有干扰的组分;(3)、尽可能地除去对分析仪器造成伤害的物质;(4)、对目标化合物进行浓缩以达到分析仪器的检测下限;(5)、调整样品的pH值、离子强度以满足分析仪器检测要求;边学边练任务:样品前处理-酶联免疫法快速检测饲料中黄曲霉***总量操作步骤:1、设备及试剂设备:微孔板酶标仪、涡旋振荡器、天平、离心机、聚苯乙烯离心管、微量移液器、移液管等。试剂:去离子水、甲醇、黄曲霉***总量ELISA检测试剂盒。2、试剂配制(1)、样品稀释液:用去离子水将浓缩品稀释液按1:9体积比进行稀释,即1份浓缩洗涤液加9份去离子水。(2)、80%甲醇配制:用去离子水将甲醇按4:1体积比进行稀释,即4份甲醇加1份去离子水。3、样品前处理1、称量:准确称取待测饲料3份,每份3g,并放置于50ml离心管中,分别加入9ml90%的甲醇,做好标记。2、混匀:分别将上述离心管在涡旋振荡器上振荡3min,设置转速为150r/min,充分混匀3、离心分离:取一个空离心管,加入去离子水称量配平后,将混匀后的离心管在转速为2000r/min的高速离心机上离心10min;4、用移液器吸取100μL上清液,加入700μL样品稀释液进行稀释,在漩涡振荡器上充分混匀后,取振荡混匀后的稀释液100μL进行分析。