2实验二生防菌的纯化和鉴定.ppt

实验二生防菌的纯化和鉴定一、实验目的学****放线菌、酵母菌的纯化培养、制片与鉴定方法,观察放线菌的细胞形态和菌落特征;认识酵母菌的菌落特征,并观察酵母菌的形态及生殖方式。二、实验原理从分离培养好的生防菌培养,挑取单个菌落,转接到新的纯化培养基上,每个单菌落划线接种,共挑取3个菌落。或划线涂于斜面试管中培养保存。三、:放线菌、酵母菌菌株。:高氏一号培养基、无菌水、石炭酸复红染液、路哥氏碘液,70%酒精等。:无菌培养皿、盖玻片、载玻片、接种环、三角玻璃棒,酒精灯、微波炉、显微镜。鹊河哪枯跟厩橡斡鉴株赠禾斑久揉渠剑陋椅焙淖缎架的笑趁蚊妻株尿注坝2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定四、实验步骤(一)单菌落、-20个菌落的皿挑取单孢菌落,制备孢子悬浮液。,转接到新的纯化培养基上,每个单菌落划线接种1个皿,或划线涂接于斜面试管中培养保存。单菌落纯化培养基纯化培养基斜面试管韭抽苦暑葬豪乡杜毗胖堑耕蚂胆职合栖碟帕隘抗篓炊哟涩浸盟寨但贾咆益2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定形态学观察培养特征生理生化特征生防菌的鉴定内容明胶液化牛奶凝固与胨化淀粉酶的活性纤维素生长试验硫化氢试验碳源的利用普通显微镜观察透射电镜菌落特征的观察黎席却巡酌房萎曳狰吗押蔼她惺鄙入垮柿铃侨划癌慧俐龚少怠援袜萝科抵2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定放线菌按培养特征和形态特征鉴定培养特征指标:<1>孢子丝与孢子(即孢子堆)的颜色,<2>气生菌丝(即形成孢子前)的颜色,<3>基内菌丝的颜色(正面与背面),<4>可溶性色素的颜色。除了观察上述色泽外,还观察菌落的特征,如菌落表面呈现的形状、干燥或湿润、气味,菌落的大小、气生菌丝的形状、有无同心环及菌落生长程度。形态特征指标:<1>孢子丝的形状,<2>孢子的形态及排列方式,闻眨卵洗饯柒壶薛秋***息逝醒汝蝴斌浊剪四腻簧邯链屿讶痹赋午陀跟寓置2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定(二)放线菌形态特征的观察方法(插片法):高氏1号。PDA:马铃薯200g、琼脂10g、葡萄糖20g、水1000ml。:,或者用接种环挑取菌体少许放入无菌水中制成孢子悬浮液;,加入高氏1号平板培养基上,用无菌刮铲涂抹均匀。,以45度角插入培养基中。~30℃下培养4~5d。:用镊子取插片一张,吸水纸擦去生长较差一面的菌丝体,然后用镊子夹住盖玻片,使有菌面朝上,通过灯焰2~3次进行加热固定,冷却。:在盖玻片上滴加1滴石炭酸复红染色1分钟,水洗,干燥。:取干净载玻片一张,盖片染色面向下放在载玻片上,依次在低倍镜、高倍镜、油镜下观察,辨认放线菌的菌丝体,孢子丝及孢子的形态及排列方式(宜用略暗光线观察)。邹田腮敬***事卧舟伸诊韵熟手动墩谢悯存氓孵憋硅徘装亲极超料宾顶系辩2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定石炭酸复红染色液配方:碱性复红(Basicfuchsin),95%酒精10ml;石炭酸()5g;蒸溜水95ml,将碱性复红溶解在95%酒精中,石炭酸溶于蒸溜水中,两溶液混合即成。:取一干净的载玻片,滴加路哥氏碘液1滴,在超净工作台里用接种环取分离的纯种菌少许,加入碘液中混匀,加盖玻片,待用。:方法同上,观察酵母菌的细胞形态及生殖方式。:仔细观察平板培养基上的孤立菌落,记载所观察酵母菌种类的菌落特征。注意:,以一边先接触液体,勿使产生气泡;。喳魂檄躺钩笛赴报咀助士妨值症迢吟挨得程鞠袱扑浸刷美馒崎县嚣姓封汤2实验二生防菌的纯化和鉴定2实验二生防菌的纯化和鉴定五、:菌落特征:圆形、较小、干燥、质地致密,表面粉粒状或绒毛状,有呈同心环或辐射状。皿内菌丝与培养基紧密结合,用针难以挑取。菌丝体与孢子常具不同色素,故菌落正面和背面可显示相应颜色。有的种类可散发特殊气味。形态特征:菌丝体成分枝丝状,发达。孢子有球形、椭圆形、杆状或瓜子型等,常呈串排列或单个存在。:菌落特征一般为圆形,表面光滑,湿润、粘稠,用针易挑取,具油脂光泽,多数种为白色,少数为红色。形态特征:单细胞,细胞圆形、椭圆形或圆柱形状,较细菌细胞大,具明显的细