酶的特异性实验报告.doc

酶的特异性实验报告酶的特异性(专一性)及影响酶活性的因素酶的特异性(专一性)。。、抑制剂对酶活力的影响。(传统酶的概念),也常称为生物催化剂。它与一般催化剂的最主要区别就是具有高度的特异性,即专一性。根据各种酶对底物的选择程度不同,可分为绝对专一性、相对专一性、立体异构专一性,。例如唾液淀粉酶属于相对专一性酶,它只能随机作用于淀粉链内部的a——1,4糖苷键,使其分子迅速断裂成较短的链,称为糊精,糊精分子量递减,淀粉——大分子糊精——中分子糊精——小分子糊精——简单分子糊精——麦芽糖和a——糊精(含a——1,6糖苷键的短链聚糖,平均分子量为8个残基)。由于淀粉酶催化所形成的产物都是还原糖,故可用灵敏度较高的Benedict试剂检测和观察。,与一般化学反应一样,提高温度可以增加酶促反应的速度,通常温度每升高10?,反应速度加快一倍左右。另一方面酶是一种蛋白质,温度过高可引起蛋白质变性,导致酶的失活。因此,反应速度达到最大值以后,随着温度的升高,反应速度反而逐渐下降,以至完全停止反应。反应速度达到最大值时的温度称为酶作用的最适温度。大多数动物酶的最适温度为37—40?,植物酶的最适温度为50—60?。但一种酶的最适温度不是完全固定的,它与作用的时间称短有关,反应时间增长时,最适温度向数值较低的方向移动。最适温度不是酶的特征性物理常数。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。大多数酶在干燥的固体状态与比较稳定,能在室温下保存数月至一年,溶液中的酶,易被微生物污染,常难长期保存,在高温的情况与,如100?即可失活。低温降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。,有些物质能增加酶的活性,称为酶的激活剂;另一些物质则会降低酶的活性,称为酶的抑制剂。例如***离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子则为该酶的抑制剂。通常情况下,很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性,而且常具有特异性,但是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质对不同的酶所起的作用不同,如镁是脱羧酶烯醇化酶的激活剂,但是肌球蛋白ATP酶的抑制剂,同一种酶也可因激活剂的浓度不同而作用不同,如CL-在低浓度时是激活剂,达三分之一饱和度时则变为抑制剂。,***,淀粉溶液:,***,淀粉溶液:,***,淀粉溶液:,***化钠的1%淀粉溶液:。漱口后将唾液吐入量筒内收集约10ml加水至200ml,%的淀粉2ml,唾液2ml混匀,每间隔1分钟取1-2滴于白磁反应板内,加KI-I检测,控制酶的浓度使反应刚好在4-5分钟内完成。,碘溶液:将碘化钾20克及碘10克溶于100毫升水中。使用前稀释10倍。(Benedict)试剂:(Na3C6O7?2H2O)和50克无水碳酸钠溶于450毫升蒸馏水中;再取硫酸铜(CuSO4?5H2O);然后将硫酸铜溶液慢慢到入前液,边加边摇