麝香通心滴丸对稳定动脉粥样硬化斑块机制探究.doc

麝香通心滴丸对稳定动脉粥样硬化斑块机制探究.doc麝香通心滴丸对稳定动脉粥样硬化斑块机制探究摘要:目的观察麝香通心滴丸稳定动脉粥样硬化(AS)斑块的作用机制。方法采用高脂饮食伴主动脉内膜球囊损伤复制家兔动脉粥样硬化斑块模型,药物(斑点輕蛇毒、组***)触发斑块破裂,观察麝香通心滴丸稳定易损斑块的作用机制。生化方法检测AS家兔的血脂及氧化应激水平;ELISA及实时荧光定量PCR(RealTimeRTPCR)法检测麝香通心滴丸对AS家兔基质金属蛋白酶2(MMP2)、TIMP2以及相关炎症介质的蛋白含量和mRNA表达水平的影响;应用TUNEL法检测麝香通心滴丸对AS家兔斑块内细胞凋亡水平的影响。结论麝香通心滴丸稳定易损斑块作用的机制有,减轻AS氧化应激损伤,降低脂质过氧化;降低MMP2含量,升高TIMP2含量,减少AS斑块内的基质降解,调节基质代谢;减少斑块内巨噬细胞的数量,降低炎性因子的表达,减轻斑块内的炎症反应;减少斑块内细胞凋亡增加斑块稳定性。关键词:易损斑块;麝香通心滴丸;炎症;基质代谢;氧化应激;凋亡中图分类号::A文章编号:16721349(2011)09108304心血管疾病是一种严重危害人类健康的疾病,全球每年近2000万人死于急性心血管事件。易损斑块是急性心血管事件发生的重要物质基础,而稳定斑块、预防斑块破裂已成为防治急性心血管事件的重要目标[l,2]o麝香通心滴丸是依据芳香温通法由古方“至宝丹”化裁而来,主要由麝香、人参茎叶总皂昔、蟾酥、人工牛黄、丹参、熊胆、冰片等药物组成,具有芳香开窍、益气温阳、理气止痛之功效,以上诸药寒温并用,以温为主;通补兼施,以补为辅,既具芳香温通之性,药力又平稳和缓。本研究在药效学实验的基础上从脂质代谢、氧化应激、炎症反应、基质代谢和凋亡等角度,探讨麝香通心滴丸稳定家兔易损斑块的作用机制,为临床用药提供实验依据。,雄性,〜,购自北大医学部动物实验中心。合格证号:SCXK(京)20050002o饲养于天津中医药大学实验动物中心,符合《中华人民共和国卫生部实验动物环境设施标准》二级标准。适应性饲养1周以上备用。高脂饲料配方,普通饲料89%(天津市武清区科达养殖中心)、1%胆固醇、大豆色拉油10%。,黄褐色粉末状,内蒙古伊泰药业有限责任公司提供,批号20061120。辛伐他汀,杭州默沙东药厂生产,(TC)、中国斑点嵯蛇毒;组***、aactin单克隆抗体;CD68单克隆抗体(美国Thermo);TC、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)试剂盒(中生北控,批号070371);基质金属蛋白酶(MMP2)、(TIMP2)、单核细胞趋化因子(MCP1)、肿瘤坏死因子a(TNFa)、oxLDL以及血管黏附分子1(VCAM1)ELISA试剂盒,购自美国RB公司;髓质过氧化物酶(MPO),南京建成,批号20080423;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成,批号070603);TRIZOL总RNA提取试剂盒(美国Invitrogen);TUNEL细胞凋亡试剂盒(美国Millipore)0日本Olympus公司正置显微镜及成像系统、;半自动生化分析仪(Micro95、荷兰威图)。(11只,每天给予普通饲料200g)及造模组(80只,每天给予高脂饲料50g,再饲以普通饲料150g)o造模组复制高脂饮食伴主动脉球囊拉伤术致动脉粥样硬化易损斑块模型,模型复制8周后根据血脂将其随机分为5组:模型组,麝香通心滴丸2mg//kg组,阳性对照组(辛伐他汀2mg/kg)o各组分别给予相应药物,连续灌胃给药12周。(每天给予高脂饲料50g,再饲以普通饲料150g)8周,并于高脂饲养两周后行主动脉球囊拉伤术。,参照文献方法[3,4]对家兔进行药物触发,,30min后耳缘静脉注射组***,于处死动物前24h、48h给予两次药物触发。(x±s)表示。正常对照组与模型组间应用t检验,模型与各给药组间应用单因素方差分析。。(AS)家兔血清血脂水平的影响与正常对照组比较,AS家兔血清TC、TG、LDL、TC/HDL均明显升高,其中以TC升高显著;麝香通心滴丸各剂量组有不同程度降低血脂水平的作用,其中