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基因诊断与基因治疗.ppt
文档介绍:
基因诊断与基因治疗(genediagnosisandtherapy)1本章讨论二大方面内容基因诊断基因治疗2一.基因诊断概念:利用现代分子生物学和分子遗传学的技术方法,直接检测基因结构及其表达水平是否异常,从而对疾病作出诊断的方法。第一节基因诊断3二.基因诊断特点:针对性强,特异性高检测灵敏度和精确性高实用性强,诊断范围广4三.基因诊断常用技术方法核酸分子杂交技术聚合酶链反应(PCR)技术生物芯片基因测序5(一)核酸分子杂交技术核酸分子杂交是指单链核酸分子(DNA或RNA)在特定条件下,与另一条互补的特异核酸链形成稳定双链的过程。主要依据:碱基互补、变性和复性DNA与DNA杂交:A=T、G≡C;DNA与RNA杂交:A=U、G≡C;变性:在一定温度下,使核酸双链解开为两条单链;复性:随温度逐渐恢复,变性的两条单链重新形成互补双链碱基互补6hybridizationDNA:DNA5’GAT3’TACGGCDNA:RNA5’ATGCGTA3’UACGCAURNA:RNA5’AUGCUACG3’UACGAUGC7利用核酸双链的碱基互补、变性和复性的原理,可以用已知碱基序列的单链核酸片段作为探针,与待测样本中的单链核酸互补配对,以判断有无互补的同源核酸序列的存在。核酸探针是指带有标记的某一特定DNA或RN***断,能与待测样本中单链核酸分子互补配对结合,进而检测同源序列。探针标记物有放射性核素或非放射性核素(生物素、***、荧光素等)两大类。81.核酸分子杂交的分类液相杂交:待测核酸样本与特异性探针同时溶于杂交液中进行杂交反应;固相杂交:待测核酸样本先结合到固相支持物上,再与溶液中的特异性探针进行杂交反应。常用固相杂交支持物:***纤维素膜、尼龙膜等---92.核酸分子杂交(固相杂交)操作程序制备待测核酸样品分离、变性、转移、固化DN***段杂交加入标记核酸探针检测杂交信号标记核酸探针预杂交制备核酸探针漂洗去除未参与杂交的标记探针10 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.