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文档分类：汽车/机械/制造 | 页数：约5页 举报非法文档有奖
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SupplementalmaterialsMaterialsandMethodsConstructionofheNOSplasmidandadenovirusproductionThePMSCV--heNOSplasmidusingspecificprimerscontainingEcoRIandSalIsites,theprimersequencesareasfollows:forwardprimer:5´-ATGGGCAACTTGAAG-3´;reverseprimer:5´-GCGTCGACTTATCAGGGGCTGTTGGTG-3´.ThePCRreactionwascarriedoutat94°Cfor2min,28cyclesof94°Cfor10s,58°Cfor30sand68°Cfor240s,ina50mlvolumecontainingPMSCV-heNOSplasmid:1ml;10×buffer:5ml;2mMMgSO4:2ml;25mMdNTP(,Shiga,Japan):5ml;KOD-pluspolymerase(ToyotoCo.,Ltd.,Osaka,Japan):1ml;primers:1mlfromeach;H2O:(NEB,Ipswich,MA),-(QiagenChina,Shanghai).uracyofPSUCMV--heNOSandadenoviruspackagingplasmidpBHGE3(providedbyVirusGeneLaboratoryofEasternHepatobilearySurgicalHospital)weretransfectedinto293cellsusingLipofectamine2000(Invitrogen,GrandIsland,NY).-,-heNOSplasmidThefulllengthcDNAof

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  • 上传人：陈潇睡不醒
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  • 时间：2020-01-27
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