基于荧光素酶报告基因的cho细胞（抗）雄激素样物质检测方法的建立.doc

基于荧光素酶报告基因的CHO细胞(抗)雄激素样物质检测方法的建立基于荧光素酶报告基因的CHO细胞(抗):(2005)—03基于荧光素酶报告基因的CHO细胞(抗)雄激素样物质检测方法的建立赵海涛朱江波朱勇飞王征马玺里张天宝第二军医大学卫生毒理学教研室,上海200433?论着?摘要:目的建立基于报告基因的CHO细胞体外(抗)雄激素检测系统,并研究2,4-DDT,甲氧***,-SV40瞬时转入CHO细胞,检测报告基因lucferase的表达,给予DHT,FLU后检测该系统的有效性和特异性,并用2,4一DDT,,l×,至l×10一mol/L可达到最大反应值,而未转染雄激素受体质粒与DHT无明显反应,FLU可以显着抑制二氢睾***的激动效应,说明检测系统有效,×10一mol/L以上2,4一DDT及3×10mol/L以上METH可对雄激素受体活性产生抑制作用,2,4-DDT的抑审l作用强于甲氧***.结论本试验建立的基于报告基因的体外(抗)雄激素检测系统是可行的,2,4一DDT,甲氧***:抗雄激素样活性中国仓鼠卵巢细胞人雄激素受体报告基因方法中图分类号::AEstablishmentofreportergene-basedassaysfortheidentificationof(anti)androgeniceffectsofchemicalsinCHOcellsZhaoHai—tao,ZhuJiang—bo,ZhuYong—fei,WangZheng,,SecondMilitaryMedicalUniversity,Shanshai200433,ChinaAbstract:0bjectiveDevelopreportergene—basedassaysfortheidentificationof(anti)androgenice~ctsofchemicalsinCHOcells,exploretheantiandrogenice~ctsof2,,-SV40usingthetransfectionreagentSofast,(DHT),flutamide(FLU),validatetheeffectivenessandspecificity,(METH).ResultsDHTiSapotentagonist,l×10mol/LDHTcouldresultintheenhancementofluciferaseactivity,pleteantagonist,,4-×10,mol/,,2,4-DDTandMETHcouldantagonizetheandrogenice~:(anti)androgeniceffect,CHOcell,humanandrogenicreceptor,receptor-,发现,探索化学物的内