Megsin及p38MAPK信号通路在糖尿病肾病发病机制中的作用.pdf

材料与方法???????????????????????79结果??????????????????????????85多日:木??????????????????????????oJ附图??????????????????????????87附表??????????????????????????97讨论?????????????????????????..100小结?????????????????????????..103参考文献???????????????????????..103第四部分缬沙坦对系膜细胞megsin表达及p38MAPK信号通路的影响前言??????????????????????????107刚舌??????????????????????????材料与方法???????????????????????107结果??????????????????????????109附图??????????????????????????111附表??????????????????????????116讨{仑?????????????????????????118小结?????????????????????????120参考文献???????????????????????120结{念???????????????????????????..124综述一Megsin与肾脏疾病??????????????????.125综述二氧化应激与糖尿病肾病????????????????..136致谢???????????????????????????.151个人简历?????????????????????????.152中文摘要Megsn及p38MAPK信号通路在糖尿病肾病发病机制中的作用摘要目的:糖尿病肾病(ephropathy,DN)是糖尿病最严重的慢性微血管并发症,是导致终末期肾衰竭(,ESRF)的主要病因,如何早期有效防治DN己成为当今国内外学者热切关注的课题。DN的发病机制非常复杂,长期以来认为是在以高血糖引起的糖脂代谢紊乱的基础上,多种因素综合作用的结果。越来越多的研究发现炎症及氧化应激在DN的发生和发展中起重要作用。肾小球系膜细胞(glomerularmesangialcell,GMC)是肾脏重要的固有细胞(inherentcell)之一,在肾脏的组织结构和生理功能方面发挥着重要作用,具有产生细胞外基质、分泌细胞因子、吞噬和清除异物等多种功能。GMC也是多种致病因子作用的主要靶细胞,在病变进展中扮演着重要角色。Megsin是一种系膜细胞优势表达基因,其表达产物属于丝氨酸蛋白酶抑制剂(serineproteaseinhibitor,serpin)超家族成员。Serpin家族成员众多,功能涉及凝血、纤溶、炎症、细胞增殖、凋亡、信号转导、消化等多个系统。Megsin可作用于其底物纤溶酶(plasmin)并抑制其活性,从而直接或间接抑制细胞外基质降解。研究表明,在IgA肾病、DNS},提示megsin与系膜细胞增生和系膜外基质积聚密切相关。目前有关megsin具体生物学功能还很不清楚,其在DN中的作用机制鲜有深入研究报道。研究表明,高血糖、炎症细胞因子、活性氧、血管紧张素II等均可激活p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen—activatedProteinKinase,p38MAPK)信号通路,它不仅参与细胞的存活、分化和凋亡等过程,还在炎症、应激反应中具有重要作用,是细胞信息传递的交汇点或共同通路。研究发现糖尿病时单核细胞趋化蛋白一1(MCP一1)及细胞问黏附分子一1()表达增多与p38MAPK通路激活密切相关。,加重糖尿病肾损伤。]ICAM一1水平可作为衡量炎性反应程度的指标。糖尿病状态下,肾组织中活性氧产生大量增加,导致脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)生成增多,总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶()中文摘要。等抗氧化酶活性下降,引起肾损害。肾素一~血管紧张素系统(renin—angiotensinsystem,RAS)的激活,是DN发病机制中的关键环节,血管紧张素II(angiotensinII,AngII)是其主要效应分子。因此,抑铝lJAngII的产生并干扰其作用是DN治疗的关键。缬沙坦是血管紧张素II1型受体拈抗剂(angiotensinIIreceptorIantagonist,ATlRa),新近研究发现这类药物具有一定的非依赖降压的肾脏保护作用。本研究分别构建megsin质粒$【