sirna靶向抑制cdca5对人肝癌细胞hepg2增殖及凋亡影响的研究.pdf

目录中文摘要..............................................................1英文摘要..............................................................3中英文对照缩略词表....................................................6前言................................................................7第一部分高表达CDCA5蛋白人肝癌细胞株的筛选..........................10一、材料和方法.......................................................10二、结果...........................................................19三、讨论...........................................................20第二部分siRNA靶向抑制CDCA5对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响.......23一、材料及方法.......................................................23二、结果...........................................................26三、讨论...........................................................30全文结论.............................................................34展望...............................................................35参考文献.............................................................36综述...............................................................39攻读硕士学位期间发表论文及参与科研课题...............................48致谢...............................................................49学位论文原创性声明...................................................50学位论文知识产权权属声明.............................................50关于学位论文使用授权的说明...........................................50万方数据中文摘要1siRNA靶向抑制CDCA5对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡影响的研究中文摘要研究背景我国是原发性肝癌的高发病率国家,全世界新发病率的55%发生在中国。每年我国总体发病率约26-32/10万人,有些地区高达70-80/10万人。肝癌死亡率极高,在所有恶性肿瘤中居第3位。肝癌起病隐匿,发病早期通常无特异性症状,极易转移,就诊时多为晚期,对放化疗不敏感。因此,寻找手术及放化疗之外新的治疗方法显得尤为重要。目前,基因治疗已逐渐成为一种肿瘤治疗的新策略。细胞分裂周期相关蛋白5(cell division cycle associated 5,CDCA5)属于肝癌数量性状位点(quantitative trait locus, QTL)区域基因,主要功能是保证姐妹染色单体在有丝分裂后期的准确分离,对于维持基因组的完整性十分必要。最近研究结果表明,CDCA5基因表达上调与肺癌、宫颈癌及前列腺癌的发生发展密切相关,且本课题组近期研究发现CDCA5基因在肝癌组织及肝癌细胞中高表达,并与肝癌的临床病理特征呈正相关。因此,以CDCA5基因为靶点的治疗有望成为肝癌靶向治疗的一个新方向。本研究采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术靶向抑制人肝癌细胞HepG2中CDCA5的表达,在体外水平研究靶向抑制CDCA5基因对肝癌细胞的增殖和凋亡能力的影响,为肝癌基因治疗的体内研究奠定基础。研究目的研究siRNA靶向抑制CDCA5基因表达对人肝癌细胞株HepG2增殖及凋亡能力的影响。研究方法1、高表达CDCA5基因的人肝癌细