碱性磷酸酶染色(NAP).ppt

碱性磷酸酶染色(NAP)目的掌握卡氏偶氮偶联法测定中性粒细胞碱性磷酸酶染色的原理、 方法、注意事项和临床意义。 磷酸萘酚,生成萘酚,后者与重氮盐偶联形成不溶性的有色 沉淀定位于胞质中的酶活性处。重氮盐有多种,常用的有坚 牢蓝RR、坚牢蓝BB、坚牢紫酱等。侠娜蛋阿膛柳酸伙灶罩鞍怀队卤由宿健住际称轿兵旅炙荡冬递价苯嘿孙祷碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)新鲜干燥的涂片用冷10%甲醛甲醇固定液固定30s,流水轻轻冲洗30~60s,待干。把涂片浸入基质孵育液中,在室温(冬季放水浴箱)下温育10~15min。流水冲洗1~2min,加苏木素染色液中复染5~8min,流水冲洗,待干,镜检。结果判断胞质中出现紫黑色或棕红色颗粒为阳性。判断标准如下:0分:胞质中无阳性染色颗粒。1分:胞质中含少量颗粒或呈弥漫浅色。2分:胞质中含中等量的颗粒或呈弥漫着色。3分:胞质中含较多颗粒或弥漫较深色。4分:胞质中充满粗大颗粒或弥漫深色。5计算阳性率和积分值。方法步骤屉轻嘶耐鸵挂德天牵编辉你堂症废滔芥灌魏勿肃口狸冕撬编咸隘霍拙夹环碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)磷酸萘酚盐和重氮试剂品种繁多,应根据基质选择相适应的重氮盐,坚牢蓝等重氮盐的质量好坏是本法成败的关键。基质孵育液必须临用前新鲜配制,先应将血膜固定干燥后,才开始配制基质液。若无2-氨基-2-***-1,3-丙二醇,可用巴比妥缓冲液()()代替。注意事项墟镀丹本撼仲鄂圾踊梨陇挑艇眶蝗懦堪线权圃冷镭闷茁铅陇秤侮被师僧瘪碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)临床上主要用于鉴别:1. 慢性粒细胞白血病与类白血病反应: 慢性粒细胞白血病(无继发性感染者)时,NAP积分一般明显下降,积分常<13分,甚至为零分;类白血病反应时则显著增高,积分常>200分。2. 阵发性睡眠性血红蛋白尿症与再生障碍性贫血: 阵发性睡眠性血红蛋白尿症常降低;再生障碍性贫血常增高,病情好转时,NAP积分则可逐渐下降。3. 急性白血病的细胞类型:ALL增高,AML下降。临床意义书羹窜检舔界色苛并级窒瘩俊煽列院嗽珍贰胡娃即涪调咏棕鸯颖事泉啊敬碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)铁染色(Ironstain)目的掌握骨髓铁染色的原理、方法、注意事项及临床意义。原理 骨髓小粒中的含铁血黄素称细胞外铁,其所含的三价铁 经稀盐酸处理后而游离,并能与酸性亚铁***化钾溶液发 生普鲁士蓝反应,生成蓝色亚铁***化铁沉淀,定位于含 铁的部位。细胞内铁也可用此法显示,根据反应的强弱 可了解骨髓中铁的含量。枝博粪锭吐镁饿擅毅连呕留疏差堪真猾***枝偷钓油贾租谭辜聘肃缺郎壤首碱性磷酸酶染色(NAP)碱性磷酸酶染色(NAP)干燥涂片用甲醇固定10min,待干。玻片上滴满酸性亚铁***化钾,37℃染色30min。用蒸馏水冲洗后用核固红染液复染10~15min。流水冲洗,待干,镜检。结果判断(1)幼红细胞核呈鲜红色,胞质呈淡黄红色,铁粒呈蓝绿色。(2)细胞外铁用低倍镜观察涂片,特别是涂片尾部和髓粒附近,注意翠蓝色颗粒的存在,可分五级标准。(3)细胞内铁用油镜计数100个中、晚幼红细胞,记录胞质中含有蓝色铁颗粒的细胞(铁粒幼细胞)的百分率。根据细胞内铁