2020年重医细菌学检验复习题.doc

1、实验室生物安全(Laboratorybiosafety):实验室的生物安全条件和状态不低于容许水平,可避免实验室人员、来访人员、社区及环境受到不可接受的损害,符合相差法规、标准等对实验室生物安全责任的要求。2、生物安全防护基本要求实验室生物安全防护(biosafetyprotectionforlaboratories)实验对象:致病的微生物及其***综合措施:实验室设计建造、个体防护设施、工作及操作程序和规程等确保:实验室工作人员不受实验对象侵染,周围环境的生物安全。实验室生物安全通用原则积极防止操作者在污染的环境中接触生物危害物;主动封闭生物危害材料产生之源,防止从操作部位向周围环境释放;尽量减少生物危害材料向周围环境意外释放所造成的后果。3、实验室必须设有专职的生物安全负责人实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。生物安全等级生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其***的危害程度分为四级。实验室生物安全防护要求:一级最低,四级最高。4、在主实验室合理设置清洁区、半污染区和污染区5、各级生物防护实验室特点一级生物安全防护实验室(BSL-1/P1):适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。二级生物安全防护实验室(BSL-2/P2)实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。在处理危险度2级或更高危险度级别的微生物时,在实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志。三级生物安全防护实验室(BSL-3/P3):适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其***,通常已有预防传染的疫苗。四级生物安全防护实验室(BSL-4/P4):适用于对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,当前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其***。6、控制措施安全设备和个体防护是实验室工作人员与致病微生物及其***直接接触的一级屏障。所有可能使致病微生物及其***溅出或产生气溶胶的操作,都必须在生物安全柜内进行。7、生物安全柜(BSC)(概念、分级及特点)具备气流控制及高效空气过滤装置的操作柜,可有效降低实验过程中产生的有害气溶胶对操作者和环境的危害。(净化排气)根据生物安全防护水平的差异,生物安全柜可分为I、Ⅱ、Ⅲ级3种类型。实验室应按要求分别配备I、Ⅱ、Ⅲ级生物安全柜。Ⅰ级生物安全柜:外部空气保证工作人员不受侵害,但不保证实验对象不受污染。Ⅱ级生物安全柜:经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气既保证工作人员不受侵害,也保证实验对象不受污染;Ⅲ级生物安全柜:经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气8、生物安全柜和超净工作台的区别超净工作台:保护样品,不保护操作者和环境生物安全柜:保护操作者、环境以及实验材料正压、简单负压、复杂不能以净化工作台代替生物安全柜,反之则能够。实验室负责人......工作人员洗手、工作区域不允许吃/喝/抽......戴护目镜或面罩、食物储存禁止口吸吸管、减少飞溅物/气溶胶、工作台表面的去污/灭活、废物去污后处理10、注:高压蒸汽灭菌:负责消毒者不准离开消毒室。制备培养基.....无菌操作.、使用酒精灯、灭菌吸管......10倍递增稀释......无菌操作;三三制:稀释三级,每一稀释度用三个平行平板;取供试液加注于平皿时,供试液须充分混匀。培养基倾注于平皿:45℃±1℃、整个操作过程应在lh内完成、无菌检验......第二章、细菌学检验基本技术临床样本的采集与送检样本采样时间采样方法注意事项血骨髓发病早期、急性期或症状典型时***10ml,儿童3~5ml;骨髓1~2ml。样本切勿冰箱存放;无菌操作;废弃物高压灭菌。尿液晨起中段尿防杂菌污染,无菌操作。尽快送检,不得加防腐剂或消毒剂。粪便急性期脓血、黏液的粪便;絮状物;直肠拭子无菌采样;新鲜;立即送检。痰上呼吸道样本晨间无限制自然咳痰、支气管镜、胃内采痰法等;鼻咽拭子漱口;立即送检或4℃保存。1、食品样本采集原则根据检验目的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方案。随机采样→代表性无菌操作,防污染。(外源性污染、样本变质和细菌生长)食物中毒时,采集可疑食物样本。2、食品样本采集种类大样、中样、小样。大样:一整批样本。中样:从样本各部分所取得的混合样本,一般为200g。小样:分析用,检样,25g。注:检验结果报告后,剩余样品或同批样品不进行微生物项目的复检3、细菌的形态结构检查法借助显微镜,对细菌形态、大小、排列、结构进行直接观察。在细菌检验中极其重要,是细菌分类和鉴定不可缺少的组成部分。样本中有无细菌及其大致的数量。细菌的形态、大小、排列、结构和染色反应性。培养物是否为纯种。普通光学显微镜(×1000=)细菌染色样本;弱光下用于不染色样本活菌的运动情况暗视野显微镜