高产绒量转基因绒山羊新品种培育任务进展.pptx

报告内容研究进展绒山羊绒毛生长相关基因FGF-5转基因克隆山羊成果总结已获成果后期工作预计开展的工作承担任务转FGF-5基因高产绒量绒山羊品种的培育1高产绒量转基因绒山羊新品种培育内蒙古农业大学承担任务与绒山羊产绒量相关的FGF-5基因毛囊特异表达载体的构建以及转基因细胞系的建立。生产转FGF-5基因的克隆胚胎100枚。培育高产绒量转基因绒山羊5-10只。筛选出2-3个未知的与产绒量相关的功能基因。转基因载体构建和转基因检测研究进展一、绒山羊绒毛生长相关基因的获得与筛选(一)利用抑制消减杂交法(SSH)构建绒山羊次级毛囊生长期(正)与休止期(反)的两向消减文库(二)应用cDNA芯片与SSH结合筛选绒山羊绒毛生长相关的差异表达基因(三)绒山羊出生2周羊羔皮肤和70天胎儿皮肤差异表达基因的筛选(一)利用抑制消减杂交法(SSH)构建绒山羊次级毛囊生长期(正)与休止期(反)的两向消减文库SSH消减杂交兴盛期毛囊和休止期毛囊cDN***段互为Tester和Driver,两轮消减杂交后,得到差异表达基因片段123456789101112131415161718192021222324255000bp3000bp2000bp1200kb800bp500bp250bp1-;13-;:约20%克隆质粒中无插入片段随机挑取正反库单克隆各12个,以T7或SP6为引物,经PCR扩增,约80%白色克隆质粒中有插入片段,-1kb,***段的T/(条)313355平均长度(bp)693596Contig数73110有效序列信息注:正反向SSH文库各随机挑取750个克隆进行测序视大于100bp的合格高质量序列为有效序列经生物信息学分析,发现与山羊类同源的序列较少,正向SSH消减文库309条序列中,山羊只有57条;反向消减文库344条中,山羊的有35条。因此,所获得的数据,极大丰富了山羊的数据资源。