全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增生及CyclinA,P16表达的影响.pdf

青岛大学
硕士学位论文
全反式维甲酸对培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞增生及
CyclinA,P16表达的影响
姓名:侯磊
申请学位级别:硕士
专业:内科学(心血管病)
指导教师:董果雄

全反式维甲酸对培养大鼠主动脉平滑肌细胞、泶锏挠跋增生及摘要目的研究全反式维甲酸对大鼠血管平滑肌细胞增生、铣梢约细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖激酶抑制蛋白泶锏挠跋欤教全反式维甲酸是否具有抑制增生的作用及其可能的机制。方法无菌条件下分离大鼠胸主动脉中层平滑肌,采用酶消化法培养,待细胞生长至%融合时,弃击培养液,换用无血清培养液,饥饿培养细胞瓜赴交贕。期。以无血清培养基培养蟮难9芷交∠赴魑6照组ヌヅQG宕碳后的血管平滑肌细胞为,同时加入全反式维甲酸¨和%胎牛血清刺激笞魑J笛樽,应用掺入率测定来观察大鼠血管平滑肌细胞增生情况及铣伤剑ü印迹和图像分析系统来观察全反式维甲酸对细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖激酶抑制蛋白泶锏挠跋臁K惺笛槭以均数±标准差硎荆榧洳钜煨员冉喜捎梅讲罘治龊蛅检验。①閂羧肼式隙哉兆槊飨栽黾琍.,而实验组的’②橛攵哉兆橄啾龋9芷交∠,血管平滑肌细胞鞍妆泶锩泶锵陆明显降低琍,笛樽橛攵哉兆橄啾炔畋鹞尥臣学意义。③橛攵哉兆橄啾龋赴芷诘鞍滓览导っ敢种频鞍譖结果显下降中文摘要琍......±.±.±
有关。④全反式维甲酸可能成为临床上一种预防和治疗动脉粥样硬化、①全反式维甲酸具有抑制血管平滑肌细胞铣桑瓜赴錾饔谩②全反式维甲酸可抑制血管平滑肌细胞周期蛋白泶锛疤岣呦赴芷诘鞍依赖激酶抑制蛋白泶铩"廴ǚ词轿姿嵋种蒲9芷交∠赴錾幕瓶赡抑制细胞周期蛋白泶锛疤岣呦赴芷诘鞍滓览导っ敢种频鞍譖支架术后再狭窄的有效药物。关键词全反式维甲酸;血管平滑肌细胞;细胞周期蛋白籔研究生:侯磊诳蒲В难9懿⊙导师:,泶中文摘要加义。....
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期能有效缓解大部分病人血管的狭窄,改善病人的生活质量,但是有%的病人发血液中的生长因子和细胞因子激活,使其表型由收缩型转变为合成型,移行周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制蛋白谙赴芷诟鹘锥蔚牡骺刂衅鹬饕W饔谩近年来,动脉粥样硬化引起的冠状动脉疾病在我国的发病率和死亡率越来越高,经皮冠状动脉腔内成形术是治疗冠状动脉粥样硬化性疾病的重要手段,手术初生血管成形术后再狭窄Q芯勘砻鱎的发生与血管平滑肌细胞的迁移增生及血管重塑有关。可分为收缩型和合成型两种表型,在正常情况下处于非增生状念,内表面有完整的内皮细胞覆盖,称为收缩型。当内皮受损时,至内膜并在此大量增生,分泌细胞外基质,修复损伤的血管。当内膜损伤严重时,过度增生,导致管腔狭窄。因此抑制增生是防治冠状粥样硬化和闹匾;。例如血管紧张素转换酶抑制剂与血管紧张素受体拮抗剂梢砸种蒲9芙粽潘豂增生的刺激作用;水蛭素可以抑制血小板源生长因子对增生的刺激作用,但均不能有效抑制或阻断增生。因此,寻找刺激增生的最终的麸同的途径加以抑制或阻断可能是有效抑制增生的关键。细胞周期可能是增生的最终的共同的途径。细胞周期的调节是多种蛋白因子参与的复杂过程,其中周期蛋白椭芷诘鞍滓览档牡鞍准っ缸槌傻挠兴糠至岩蜃右约跋赴且恢终缘鹘谝蜃樱煞直鹩隒纬筛春衔铮赟期和/谄鹱饔茫偈笵复制的完成。箍捎攵嘀值鞍字室蜃咏岷希⑹油つ赶赴,鞍椎龋筊鞍琢姿峄头臙,加速细胞周期的进程,促进细胞分裂和组织增生。鞍资窍赴芷诘母悍蠢〉节因素之一,该蛋白能专一地与,结合,阻止它们与的结合,抑吾月刚百
材料和方法止细胞周期的正常进程,则可能有效抑制或阻断的增生。能通过细胞核上多种受体产生广泛的生物学效应,如抑制外源性凝血,抑制细胞迁增生的影响报道较少。本研究观察了对培养的大鼠錾作用及其可链的机制,从雨为临床用药提供依据。一、材料芰鋀笫恕獼克左右鹤郧嗟捍笱б窖г憾锸匝橹行摹培养基:美滑肌肌动蛋白免疫组化试剂盒:武汉博士德生物工程有限公司辣根过氧化物酶标记的二抗:【。因此假如能够寻找一种或几种药物来作用于駽趸夯蜃全反式维甲酸,且恢痔烊晃谹类衍生物,移、分化、增生!6嗄昀矗矶喽訟难芯恐饕<:上海生物化学试剂公司氚标记胸腺嘧啶核苷猋褐泄蒲г罕本┰幽苎芯克抗豢梗篠生物