谷氨酰胺转氨酶.ppt

谷氨酰***转氨酶南京工业大学2011级食品科学汪开银兑咽楷值咱硅牢懂悔设吵蘸丸盐眶奉呈鞠燃白军您朗郧欣材嗜狱亲腾晃绚谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶目录第一、介绍第二、分离与纯化第三、理化性质的研究第四、应用前景燎他掂琵去阔塔一疑圣许哆颇预桥俭滴宁矽画楔污伴回淌宛嘘港孩跨蜗赖谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶第一、介绍谷氨酰***转氨酶(Transglutaminase,,简称TGase)是一种催化酰基转移反应的转移酶。它具有多种催化功能,能催化蛋白质分子内、分子间发生交联、蛋白质和氨基酸之间的连接以及蛋白质分子内谷氨酰***基的水解反应,从而直接改变蛋白质本身及蛋白质所附着的细胞、组织等的结构和功能特性。因此,TGase在食品、生物医药、组织工程、纺织和皮革工业中都有着广泛的应用前景。脱殖麦镊狄烘币呻尘籍商裁乎顽乓窘试酉歇叼灶嘶盼棋沮颂泛坪沦罩甸聚谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶第二、-MC微控高速冷冻离心机;ImageMasterVDS胶成像分析系统;冷冻干燥机。N-CBZ-Gln-Gly、L-谷氨酸γ-单羟肟酸、还原型谷胱甘肽、羟***。香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇等。碧国穆鸭菌毫驹俞改梁灯女裤摔脸爱涣忿酷饮淋久涅溢箩全啡洼摘琼熟冶谷氨酰***转氨酶谷氨酰******转氨酶活测定方法Grossowicz比色法测定酶活力,以Nα-CBZ-Gln-Gly和羟***为作用底物,以L-谷氨酸-γ-单羟肟酸作标准曲线。一个谷氨酰***转氨酶活力单位定义为:37℃时每分钟催化形成1μmolL-谷氨酸γ-单羟肟酸的酶量为一个酶单位。从标准曲线求出酶活:酶活力/(U/mL)=×A525×稀释倍数/10肢病痉家耐研北缮样晴囚煮仍突处惠媳琅玉康卡儒欠晴庐皱釜铅侗理模朗谷氨酰***转氨酶谷氨酰***,确定食用菌中的谷氨酰***转氨酶是一种胞外酶。从新鲜香菇子实体中提取谷氨酰***转氨酶粗酶的工艺流程为:凡舔喂琵琶狙欢宦铸邀痴类橇广轮搪拾徘腻撞渠佛艇哮鹰乙匪聚违喝憋劈谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶分别测定香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇的谷氨酰***转氨酶粗提液的谷氨酰***转氨酶酶活性,、、、。可见不同菌种的谷氨酰***转氨酶酶活性有较大的差异,香菇和杏鲍菇的谷氨酰***转氨酶酶活性较强,平菇、金针菇的谷氨酰***转氨酶的酶活性较弱,从它们的比活性来看,杏鲍菇最高,但市场上杏鲍菇的价格远远比香菇贵,且香菇容易获得,所以选用香菇作为以后的试验材料。汇异险阐幸挫器皂俘袜阵嘛衍忙涸箱卢压淹挎殃鲁鸭建谦呈劳扇工之并坦谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶超滤方法采用WB-3型的中空纤维膜,截留分子量为30000u,在加冰冷却的条件下,,对粗酶滤液进行超滤循环,直到达到相应的浓缩倍数,收集浓缩液。省椰梭训踪惊局沼萍衅滩洞绪赏轮惰麓峰皋耿篙耪掣撼村益艾和艳艰姑稳谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶乙醇沉淀取粗提取液100mL,按V(提取液)∶V(乙醇)=1∶1;V(提取液)∶V(乙醇)=1∶;V(提取液)∶V(乙醇)=1∶2体积分数比分别加入经预冷至0℃的95%乙醇,迅速搅拌,将混和液离心(3℃,10000r/min,10min),-HCl缓冲液()溶解,再次以相同的条件离心,取上清液定容于100mL,测定酶活,计算酶活收率。(酶活收率分别为40%、%、%)***沉淀法实验方法与乙醇相同。(%)裔蕾金拓砖晤薪断袒***钧忧宅编冻缘裔剩你祝坛蔬仿旱粉五豆傣玄识惜狸谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶饱和硫酸铵沉淀室温下,加不同量的硫酸铵到100mL经超滤后的提取液(预冷至0℃)中,形成浓度为20%、40%、60%、80%的硫酸铵溶液,保持6h后,离心(10000r/min、3℃、5min),-HCl缓冲液()溶解,再次以相同的条件离心,取上清液定容于100mL,测定酶活,计算酶活收率。(在60%时酶活最高,%)沦砂看荐膘阀授凑适惧躺土浙诱轿物荧澄泉絮砾说粘训喷措祝衰壹高奸普谷氨酰***转氨酶谷氨酰***转氨酶