生物选修三考点知识点.docx

1 [ 专题一] 第一节 1 、基因工程的概念基因工程是在 DNA 分子水平上进行, 又叫做 DNA 重组技术。优点包括目的性强、定向改造生物的性状、克服远源杂交的不亲和性。 2 、基因工程的基本工具包括限制性核酸内切酶、 DNA 连接酶、载体 3、限制性核酸内切酶(1 )来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2) 功能: 能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列, 并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3 )结果:形成两种形式 DNA 片段末端: 黏性末端和平末端。 4、 DNA 连接酶的功能是缝合两个 DNA 片段之间的磷酸二酯键,与 DNA 聚合酶作用的异同:DN A 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。 5 、载体(1 )载体具备的条件: ①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。(2) 载体包括质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒, 最常用的载体是质粒, 主要来自细菌, 它是一种裸露的、结构简单的双链环状 DNA 分子。第二节 1 、基因工程的基本操作程序包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达 2、目的基因的获取(1 )目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因(2 )目的基因的来源包括从自然物种直接分离获得, 人工合成获得。主要是人工合成。(3 )基因文库包括基因组文库和部分基因文库(4) PCR 技术扩增目的基因 1) PCR 的含义:是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。 2 )目的:获取大量的目的基因 3 )原理: DNA 双链复制 4 )过程: 第一步:加热至 90~ 95℃, DNA 解链为单链; 第二步:冷却到 55~ 60℃, 引物与两条单链 DNA 结合; 第三步:加热至 70~ 75℃, Taq 酶从引物起始进行互补链的合成。 5 )特点: 指数形式扩增 6 )材料: 目的基因的两条链, 引物、 Taq 酶、四种脱氧核糖核苷酸 3、基因表达载体的构建基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、终止子、标记基因。其中启动子:是 RNA 聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出 mRNA 。 4 、将目的基因导入受体细胞_ (1 )转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。(2 )常用的转化方法: 2 将目的基因导入植物细胞: 采用最多的方法是农杆菌转化法, 其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞: 原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少, 最常用的原核细胞是大肠杆菌, 其转化方法是: 先用 Ca 2+ 处理细胞, 使其成为感受态细胞,促进感受态细胞吸收 DNA 分子。(3) 筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 4 、目的基因的检测和表达 DNA 分子杂交(DNA-DNA) 技术, 检测目的基因; DNA 分子杂交(DNA-RNA) 技术检测转录出 mRNA ; 抗原—抗体杂交技术检测翻译成蛋白质;接种实验进行个体生物学水平的鉴定 1. 植物