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大叶小檗体外对细菌抑菌活性的研究.doc
文档介绍:
大叶小檗体外对细菌抑菌活性的研究.doc大叶小槃体外对细菌抑菌活性的研究中图分类号:R37文献标识码:A文章编号:1005-0515(2013)10-030-02大叶小樂(BerberisamurensisRupr.)为小樂科小樂属植物,又名三颗针。主要分布在我国东北,是东北地区重要的药用植物[1-3]o中药主要以其根和根皮入药,是长白山区民间的常用药材[4]。具有消炎止痛,解毒清火等功效。果实可健胃,根皮也可以外用[5]。本实验通过研究大叶小樂体外抑菌活性实验,观察其消炎抗菌[6]作用及对革兰氏阳性菌敏感情况[7]。为开发其药用价值提供依据。1材料与方法1.1一般材料1.1.1供试菌种大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌,实验所用菌种均来自吉林农业大学食品科学学院。1.1.2仪器与试剂DIIG-9140A电热恒温鼓风干燥箱(上海精密实验设备有限公司);SHZ-III循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂)YXQ-LS-50SII立式压力蒸汽灭菌器(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)IIII?CP-01W二氧化碳细胞培养箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)大叶小漿采集于长白山,由吉林农业大学包海英教授鉴定为大叶小槃根。供试阳性药阿米卡星(批号为070905),江苏吴中医药集团有限公司苏州第六制药厂;***霉素(批号为0806092),天津药业集团新郑股份有限公司;硫酸庆大霉索(批号为0709302),天津药业集团新郑股份有限公司;供试阳性药•均于福百草药房内购买。1・2方法1・2.1提取物配制:取大叶小漿块根2.0kg粉碎成粗粉,用适量体积的75%乙醇浸渍提取三次,每次10h,合并提取液过滤,减压浓缩后置水浴锅上至浸膏状,取适量浸膏密封保存备用。将剩余的浸膏用2%盐酸将溶解,静置24h后取,取其上清液用与酸水等体积的***仿重复萃取,至完全除去杂质,再用氨水调pH值至10,Z后用等体积的***仿萃取,使样品与生物碱化学检识均呈阴性。收集***仿层并浓缩蒸干至浸膏状,即得总生物碱。分别称取定量的大叶小糜75%乙醇提取物、总生物碱于研钵中,用适量的生理盐水及少量的吐温-80研磨,至样品与生理盐水充分混合成混悬液,并以生理盐水及吐温-80混合液为空白对照,以上样品配置好后均需密封低温保存。1.2.2供试阳性药的筛选在无菌条件下精确分别吸取200u1菌液滴于平板培养基上。采用纸片扩散法,做3个平行,密封好后置于C02恒温培养箱中,在37°C下培养16〜18小时后观察每个平板上的抑菌圈,并用十字交叉法测量其直径。通过表1-1的数据可知,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌抑菌效果最佳阳性药均为阿米卡星,浓度为1・28mg/inLo1.2.3受试样品抑菌实验方法精确吸取上述四种供试菌液滴于平板培养基上。采用纸片扩散法,做3个平行,密封好后置于C02恒温培养箱中,在37°C下培养16〜18小时后观察并测量各抑菌圈直径,记录数据。1.2.4统计学处理:结果要根据抑菌圈直径(mm)以及抑菌率(%)来判定药物的抑菌活性,抑菌率计算公式为:所得数据均要用±s表示,并通过SPSS18.0进行统计分析。2结果如表1-2所示,通过实验证明大叶小糜75%提取物,大叶小糜总生物碱对各受试菌种有较好的抑菌效果,口随着受试样品浓度的增加,抑菌率呈上升趋势。4讨论木论文采用纸片 内容来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.