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pcr技术及其应用ppt课件.ppt

文档分类：高等教育 | 页数：约40页举报非法文档有奖

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(PCR:PolymeraseChainReaction),此技术获得1993年诺贝尔化学奖。(IIIIII)拓扑异构酶解旋酶类SSB引物dNTPMg2+5’3’***(thermusaquaticus)酶活性(%)温度(℃)405060708090100**********耐热DNA聚合酶Saiki(1988)将耐热DNA聚合酶引入PCR,使利用热变性解链DNA模板可行。℃94℃55℃(2n)引物延伸延伸5’5’3’3’变性、退火变性、退火变性、+模板:DNA引物:P1+P2DNA聚合酶:TaqE原料:dNTP反应缓冲液10xBuffer辅助因子:Mg2+)PCR反应成分(1)模板单、双链DNA均可。不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制剂、DNA结合蛋白类。DNA模板一般100ng/100L。模板浓度过高会导致反应的非特异性增加。PCR反应条件10.

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