2.植物离体繁殖(植物组织培养).doc

2.植物离体繁殖(植物组织培养).doc第二章植物离体繁殖植物离体繁殖:利用组织培养技术对外植体进行离体培养,短期内获得遗传性一致的大量再生植株。也叫快繁或微繁。和传统方法突出特点:1、 繁殖效率高:增值率高,生长速度快,可周年生产,在一个短暂的时间,由单一个体开始,能产生出大量的遗传组成相同的植株。(如苹果矮化砧木茎尖8个月可繁殖6万株,石刁柏一个腋芽一年可繁殖7万株)2、 培养条件可控性强:人为提供培养基及小气候,便于对环境进行控制,省去田间栽培繁杂劳动。3、 便于管理、占地面积小:30m2可存放1万多培养瓶,约10万多苗木。4、 利于种质资源的保存及交换。快速繁殖的应用(1) 短期内获得大量形状优良、整齐一致的种苗群体。加快引进新种、新育良种的繁殖,促进优良品种推广和应用。(2) 大量繁育原来常规方•法不能进行无性繁殖、难繁殖和繁殖速度慢的一些植物,尤其对一些珍、稀、濒危的植物的繁殖有更重要的意义。(3) 作为培育新品种的有效手段,繁殖和保存育种材料。如远缘杂种、多倍体、突变体。(4) 通过茎尖培养等技术脱毒,扩增脱毒苗,达到提纯复壮良种的目的。一、植物快繁的器官形成方式由于植物种类不同,器官再生及快速繁殖的方式也不同。1、短枝发生型:外植体为带叶单芽茎段,培养为完整植株。特点:一-次成苗,培养过程简单,容易移栽成活,遗传性状稳定。例如:偷萄、红薯等试管苗繁殖。2、器官型:外植体带有顶芽或腋芽。培养后形成丛生芽,转入生根培养基,诱导生根成苗,扩大繁殖。特点:由单芽到丛芽,繁殖速度快,遗传性状稳定,多数花卉、苗木的快繁属于此类。3、器官发生型:直接由外植体上或从愈伤组织产生不定芽,经过脱分化与再分化成苗。特点:繁殖速度快,由愈伤组织再生植株,遗传不稳定。烟草、水稻、小麦、番茄等。4、胚胎发生型:外植体脱分化产生愈伤组织或细胞团,再分化为胚状体产生小植株(球形期、心形期、鱼雷期、了叶期)特点:发生数量大,速度快,结构完整,人工种子繁殖,遗传变异。5、原球茎发生型:兰科。茎尖或腋芽外植体通过形成原球茎,而发育为完整植株。二、植物快繁的程序和关键技术离体无性繁殖的程序包括:无菌母株的制备,羸代芽的增殖,芽苗生根培养,再生植株的锻炼和移栽。1、无菌母株的制备初代培养:在无菌条件下,制备无菌繁殖的材料称为无菌母株,或繁殖母株。选取遗传性状优良、稳定,生长健壮、无病虫害植株上的外植体,经适当有效灭菌处理后,接神在培养基上,诱导其产生芽(腑芽或不定芽)和愈伤组织。注意:培养基激素配比,取材的年龄、大小和生理状态。初代培养的启动生长方式:腋芽被刺激后生长;茎段、叶片、其它器官伤口处产生不定芽;外植体切曰产生愈伤组织。此阶段-般需要4-6周° /愈伤组织茎端、次生分生组织嫩枝一►表而消蓦带E个芽的茎毁一►谤导不定芽2、继代芽的增殖无菌母株再次切割继代培养,芽分化增殖成丛芽,加快繁殖速度。在快速繁殖过程中,随培养时间和继代次数增加,芽分化和生长速率降低,称为驯化现象,与内源激素和恒定培养条件有关,故可以调节激素配比或变温处理,提高繁殖速度。3、芽苗生根培养诱导无根苗生根的方法有两种:试管内生根和试管外生根。1)试管内生根:将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养。提高生根率的措施:降低无机盐和有机物含量(如1/2MS或1/4MS培养基)适当提高生长素的浓度,降低细胞分裂素的浓度。降低渗透压(糖30g/L—20