3.1《菊花的组织培养》学案.doc

3.1《菊花的组织培养》学案.doc课题1菊花的组织培养学****目标说明植物组织培养的基本原理。。。学****重点与难点重点:。难点:。 。自主探究导学案植物组织培养的相关概念和基木过程植物组织培养的相关概念(1) 细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在、和上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因的结果。(2) 细胞的全能性:的植物细胞仍然具有发育成为的潜能。细胞全能性是组织培养的基木原理。(3) 愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过过程形成的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种的呈无定形状态的。(4) 脱分化:由的植物组织或细胞产生的过程,称为脱分化,又叫去分化。(5) 再分化:脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成,这个过程叫做再分化。(6) 外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。 :不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。同种植物材料,,等也会影响实验结果。菊花的组织培养,一般选择的茎上部新萌生的侧枝。外部因素:(1)营养条件常用的是培养基,其主要成分包括:,如;,如;等。(2) 植物激素 植物激素中和是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。、以及等,都会影响实验结果。(3) 环境因素、、等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一般PH控制在;温度控制在;每天用口光灯照射小时。【思考】(1)MS培养基中,各种营养成分各有什么作用?与微生物培养基的配方相比,有什么不同?(2)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响?三、实验操作过程制备MS固体培养基实验室…般使用4°C保存的配制好的培养基母液来制备(1) 配制各种母液。配制母液时,大量元素浓缩,微量元素浓缩。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照lmg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。(2) 配制培养基。配制1LMS培养基时,将称量好的琼脂加入800mL蒸馅水,加热熔化,然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至lOOOmLo,然后分装到锥形瓶电每瓶分装。(3) 灭菌。高压蒸汽灭菌2、 外植体消毒选取菊花茎段时,要取O无菌技术包括培养基消毒火菌和植物材料(外植体)的消毒火菌。对培养材料进行表面火菌时,一方面要考虑;另一方面还要考虑植物材料的。不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,真菌污染可能是灭菌不当。过程:流水冲洗一软刷刷洗一流水冲洗①过程流水冲洗一软刷刷洗一流水冲洗-无菌吸水纸吸干外植体表面一体积分数为的酒精中摇动2〜3次,%的溶液中1〜2minf无菌水中至少清洗3次3、 接种接种前,用体积分数70%的酒精将工作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行,并旦每次使用器械后,都要用火焰灼烧灭菌4、 培养接种后的锥形瓶最好放