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离子交换色谱ppt展示.ppt

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离子交换色谱——运用与分析主讲:许先融编辑:资料搜集:刘佳娜李春凤甘权贤资料整理:李扬帆刘雁08中药分析与鉴定(1)班基本原理:离子交换色谱(ionexchangechromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。主要用于分离离子或可离解的化合物,包括氨基酸,多肽,核酸,核苷等各种生物大分子。离子交换色谱的运用:分离纯化生物大分子Po+ZDo=Pb+ZDb重视Po:流动相中溶质的浓度;Pb:填料表面上被吸附的溶质浓度;Do:流动相中洗脱剂的浓度;Db:填料表面上洗脱剂的浓度;Z:蛋白质在吸附过程中从填料表面上被置换的洗脱剂的数目;以离子交换色谱快速纯化8一研究探讨离子交换色谱本研究利用合成的强阴离子交换柱很好地分离了a-淀粉酶粗品,其活性回收率高达96%,比活性达388ug/mg蛋白质纯度提高30倍。此法的研究成功为大规模制备高纯度a-淀粉酶提供了一个新工艺路线。高纯度的8一淀粉酶可作为酶试剂,研究生物作用的特性、酶反应机理,测定生化反应的平衡常数。:-淀粉酶试剂,于小离心试管中,,溶解后,在1300r/min的高速离心机上离心5min,小心转移上部清液于另一离心试管中,此液相当于1062u/ml活力.

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