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ChIP实验课件幻灯片资料.ppt

文档分类：中学教育 | 页数：约31页举报非法文档有奖

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ChIP实验课件幻灯片资料.ppt黄文锋文献汇报之染色质免疫沉淀(ChIP)技术及其应用2009年7月27日主要内容何谓ChIP实验技术ChIP技术基本步骤及注意事项ChIP实验技术的应用何谓ChIP实验技术染色质免疫沉淀技术(ChromatinImmunoprecipitation,简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性,可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。是目前确定与特定蛋白结合的基因组区域或确定与特定基因组区域结合的蛋白质的重要方法。是深入分析癌症,心血管等疾病的主要代谢通路的一种非常有效的工具。何谓ChIP实验技术ChIP技术的基本步骤基本步骤优秀幻灯片DNA的分析鉴定染色质的断裂细胞的固定染色质免疫沉淀交联反应的逆转及DNA的纯化细胞的固定交联所用的甲醛终浓度为1%,交联时间通常为5分钟到1个小时,具体时间根据实验而定。ChIP实验利用甲醛在生理状态下使蛋白质-DNA交联,形成生物复合体,避免了DNA结合蛋白在染色质上的重新定位,或者在后续的生化分离中丢失。甲醛是一种高分辨率的可逆的交联剂染色质结构本身是动态的,并且DNA与非组蛋白相互作用常是瞬时的。注意事项交联时间过长,细胞染色质难以用超声波破碎,影响实验结果。交联时间如果过短,则交联不完全,产生假阴性。甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。

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