DB32T 3806-2020 猕猴桃细菌性溃疡病监测规范.doc

ICS —2020     猕猴桃细菌性溃疡病监测规范Guidelineforsurveillanceofkiwifruitbacterialcanker2020-05-25发布2020-06-25实施江苏省市场监督管理局 发布前  言本标准按照GB/—2009给出的规则起草。本标准制定由江苏省中国科学院植物研究所提出。本标准由江苏省林业局归口。本标准起草单位:江苏省中国科学院植物研究所,江苏长江果品产业研究院有限公司。本标准主要起草人:贾展慧、王刚、张计育、王涛、郭忠仁、宣继萍、张英、沈强、王建。猕猴桃细菌性溃疡病监测规范范围本标准规定了猕猴桃溃疡病的监测原理、监测准备、监测区域、监测时期、监测方法、可疑样本检测方法、监测结论和资料保存。本标准适用于江苏地区猕猴桃细菌性溃疡病的疫情监测。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T23621—2009 农业植物检疫实验室基础条件LY/T 1681—2006 林业有害生物发生及成灾标准监测原理丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv. actinidiae,Psa)属于薄壁菌门(Gracilicutes)变形菌纲(Proteobacteria)假单胞菌科(Pseudomonadaceae)假单胞菌属(Pseudomonas),是引发猕猴桃细菌性溃疡病的致病细菌。设置监测区域,通过踏查和调查,依据猕猴桃细菌性溃疡病田间症状(参见附录A)、可疑样本病原菌检测及病原细菌生物学特征、致病性和分子生物学检测鉴定结果进行病害监测。监测准备收集当地猕猴桃属植物种植情况、猕猴桃细菌性溃疡病发生历史和现状等相关资料,制定有效易行的猕猴桃细菌性溃疡病监测计划。、林场、种质资源圃、种苗繁育基地、砧穗繁殖圃、境外引进猕猴桃种苗种植区等,重点监测红阳、金艳、楚红、Hort16A、西选2号等易感病猕猴桃品种的集中种植区域。未发生区重点监测疫情高风险区域,包括毗邻发生区的区域、有猕猴桃细菌性溃疡病发生历史的果园、新建果园;猕猴桃产品集散地周围猕猴桃种植区,通往疫情发生区域交通要道沿线猕猴桃属、种植物等。发生区重点监测发生猕猴桃细菌性溃疡病的种植区及周边区域。监测时期在每年3~4月春芽膨大期和9~10月初秋溃疡病发病小高峰时期分别进行1次监测;11月下旬至来年1月期间遭遇大风、暴雨、极速降温等异常天气应及时增加1次监测。、相关生产经营者、农技人员等询问调查当地猕猴桃种植和猕猴桃细菌性溃疡病发生的情况,特别是苗木、接穗和花粉来源和有无猕猴桃细菌性溃疡病疑似症状等情况,。踏查对访问调查过程中发现的疫情发生区、可疑发生区和高风险区域进行重点踏查,踏查面积不小于被查面积的50%。以自然界线、道路等为单位进行线路(目测)踏查,重点检查枝蔓及其分杈处、茎蔓幼芽、皮孔、落叶痕和新生叶片等()。踏查发现可疑症状应直接采样进行室内检测。确认有疫情需进一步掌握危害情况的,应设样方做详细调查。样方调查种苗、接穗繁育基地样方设置与调查样方的累积面积应不少于调查总面积的5%。,采取棋盘式取样法,抽取样树5株~10株,进行病害分级调查(参见附录C)。果园样方设置与调查按果园面积设置,10hm2以下(含10hm2)设1块样方,每增加5hm2增设1块样方。,采取棋盘式取样法,抽取样树10株,进行病害分级调查(参见附录C),。、花蕾、嫩梢、枝条等部分,应尽可能采集病株感病初期的部位,以利于病原细菌的分离。样品保存样品置于聚乙烯袋内或其他合适容器内防止污染。样品应冷藏存放,避免受到阳光的照射。实验室要求猕猴桃细菌性溃疡病菌鉴定用实验室的设置与管理符合GB/T23621—2009中农业植物检疫实验室基础条件要求。常规检测溢菌检查用手术刀取一小块病健交界处组织,放于载玻片上,向病变组织上滴1~2滴无菌水或蒸馏水,加盖玻片后在低倍显微镜下(10X)观察,检查在水滴与组织交界处是否有云雾状菌溢。革兰氏染色检测检查到菌溢的载玻片将植物组织移去,水滴干燥后通过火焰固定,采用结晶紫草酸***染色法染色,观察染色反应。形态特征检测病原菌分离纯化、保存过程参见附录D。,根据菌落特征选取可疑菌落做进一步