MIF在不同宫颈癌细胞株中的表达及其对宫颈癌细胞株增殖的影响.pdf

山西医科大学硕士学位论文 MIF在不同宫颈癌细胞株中的表达及对宫颈癌细胞株增殖的影响姓名:范锦申请学位级别:硕士专业:妇产科学指导教师:吴素慧 20100315 山两医科大学硕_I:学位论文中文摘要宫颈癌,是最常见的恶性肿瘤之一,发病率位于女性肿瘤的第二位。山西省是国内外罕见的宫颈癌高发区,且发病人群有年轻化趋势,因此宫颈癌是严重威胁我省妇女健康的疾病之一。肿瘤的主要特征是恶性细胞的持续性增殖。本课题组前期对早期宫颈鳞癌(SCC) 进行了cDNA基因芯片筛查,发现MIF在早期宫颈鳞癌有淋巴转移组织中表达上调,提示 MIF可能促进宫颈癌的发生发展。目的:研究MIF、CD74、P13K、cvClinDl、慰67在人宫颈癌细胞株C33A、Siha、CaSl(i 中的表达,探索MIF与CD74在宫颈癌发生发展中的作用,探索MIF和P13K、cyclinDl、硒67在宫颈癌恶性增殖过程中的作用与联系,以期为宫颈癌的深入研究提供新的思路和方法。方法:首先,采用免疫细胞化学、Westenl Blot、ELISA检测人宫颈癌株C33A、Siha、 Caski中MIF、CD74、P13K、cyclinDl、Ⅺ67的表达;其次,利用细胞增殖实验(MTT) 观察人重组MIF刺激后宫颈癌细胞株C33A、Siha的增殖情况,并通过免疫细胞化学、 Westem blot技术检测在人重组MIF刺激后MIF、P13K、cyCliIDl、硒67在细胞株中的蛋白表达;最后,(MIF特异抑制剂)对宫颈癌肠转移细胞株 Caski增殖作用的影响,采用免疫细胞化学、westenl blot、ELISA检测MIF、P13K、cyclinDl、 。结果:MIF、CD74、P13K、cvclinDl、鼬67在人宫颈癌细胞株C33A、Siha、Caski中均有阳性表达,且在高转移细胞株Casl【i中的表达最高,其次为在HPvl6阳性的Siha细胞中的表达,在HPV阴性的C33A细胞中的表达最弱,三者相比差异有显著性(尸<); 同样,上述三种宫颈癌细胞株均可分泌一定量的MIF蛋白,在高转移细胞株Caski中的分泌量明显高于HPVl6阳性的Siha细胞,在HPV阴性的C33A细胞中的表达最弱,三者相比差异有显著性(P<)。人重组MIF可明显促进宫颈癌细胞的增殖活性,并且促进MIF、P13K、cyclinDl、融67 各细胞中的蛋白表达。,人宫颈癌肠转移细胞株Caski的增殖活性明显降低, MIF、P13K、cyclillDl、鼬67的蛋白表达量显著下降。结论:MIF在各宫颈癌细胞株中表达程度不同,其表达强弱与宫颈癌细胞高危型HPV 感染及转移潜能有关,说明MIF是参与炎症与肿瘤发生发展的重要细胞因子。MIF可直接促进宫颈癌细胞的增殖,或通过上调cyCliIlDl的表达,进而影响细胞周期进展,促进癌细胞的恶性增殖。,抑制宫颈癌细胞的增殖,或下调cvClinDl的表达,降低宫颈癌细胞的增殖活性。这一过程可能需要P13眦t细胞信号通路的参与,但其具体机制需进一步研究。针对 MIF在宫颈癌细胞株增殖中作用机制的研究将有助于进一步了解宫颈癌的发生与发展,为山两医科大学硕上学位论文宫颈癌的临床诊断提供理论依据,为宫颈癌的个性化治疗寻找一条新思路。关键词:宫颈癌细胞株、细胞增殖、MIF、cyClinDl、鼬67 山西医科人学硕士学位论文 ABSTRACT 0ftheuterinece州x istheseCond conⅡnonest cancer order t0 underst锄dcarciIlogeIlesis,developmeIlt mechaIlism ofceⅣicalc锄c%our preViolls study had selected medi侬彻tial expression geIle by cDNA gelleChip aIldfound many g锄es correlated stron酉y witlldevelopment ofearlysqu锄ous cervical ,the expression of macrophage mi莎ationiIl:llibit0巧factor(MIF)ine砌ysqu锄ous cervical c锄cer winl 1),lIlph node metastasedw嬲lli曲efⅡl锄wim no metastaticlymph