高效液相色谱培训教案.ppt

高效液相色谱法HighPerformanceLiquidChromatography青海大学分析测试中心李德英第一章绪论第二章高效液相色谱基本概念第三章高效液相色谱仪构成介绍第四章高效液相色谱方法及原理第五章高效液相色谱方法的建立及应用第一章绪论第一节高效液相色谱的特点第二节高效液相色谱的分类第三节高效液相色谱的应用范围和局限性高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)还可称为高压液相色谱(highpressureliquidchromatography)、高速液相色谱(highspeedliquidchromatography)、高分离度液相色谱(highresolutionliquidchromatography)或现代液相色谱(modernliquidchromatography)。图示固定相——CaCO3颗粒流动相——石油醚植物色素混合物7、70年代HPLC崛起,气相色谱和高效液相色谱,逐步成为各行各业必不可少的分析工具,广泛应用于各个生产领域。8、1975年,,在分离柱后加一个抑制柱,同年商品化的离子色谱仪问世。9、1979年,。10、20世纪80年代以后,一种新型的色谱技术—毛细管电泳技术随之出现。11、20世纪90年代以后,ELSD一种新型的检测器出现,改变了弱紫外吸收物质的梯度检测难题。12、20世纪90年代中期以后,用于HPLC的MS检测器开始普及,使液相进入定性的时代。进入21世纪,HPLC在多个方面取得突破:Merck商品化的一体化柱,给人们一种全新的色谱柱概念。2004年,Waters提出了UPLC的新概念,超高压液相色谱。借助小颗粒的填料,特殊化的设计,实现超高效和快速、高通量的分析。2004年10月13日,ESA公司向外界宣布了一项高效液相色谱的最新技术突破,Corona™带电气溶胶检测器(CAD)诞生,新一代的通用型检测器。2005年,岛津发布了第一个基于Web的HPLC系统。HPLC向高通量、高灵敏、网络化、小型化发展。二、色谱法定义、分离基础和目的定义:利用各组分物理化学性质的不同,在流动相流 经固定相时,由于各组分在两相间的吸附、分 配或其它亲和力的差异而产生不同速度的移动,最终达到分离的目的。图例分离基础:差速迁移(例:赛跑)目的:多组分分离,实现定性定量分析图示分离机制:各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离吸附→解吸→再吸附→再解吸→无数次洗脱→分开碳酸钙吸附剂石油醚流动相色素三、,高效液相色谱法和经典液相(柱)色谱法没有本质的差别,但由于它采用了新型高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,而使经典的液相色谱法焕发出新的活力。