多糖的提取和纯化.doc

多糖得提取与纯化多糖得提取与纯化多糖得提取与纯化摘要本文较详细地介绍了多糖得提取与纯化方法,为多糖得研究与生产提供参考依据。关键词多糖;提取;纯化;活性炭多糖(polysacharides,PS),又称多聚糖,就是由10个以上得单糖通过苷键连接而成得,具有广泛生物活性得天然大分子化合物。它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物(细菌与真菌)与动物体内。20世纪60年代以来,人们逐渐发现多糖具有复杂得、多方面得生物活性与功能[1]:(1)多糖可作为广谱免疫促进剂,具有免疫调节功能,能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病,甚至能抗AIDS病毒[2]。如甘草多糖具有明显得抗病毒与抗肿瘤作用[10],黑木耳多糖、银杏外种皮多糖与芦荟多糖可抗肿瘤与增强人体免疫功能[35]。(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质得生物合成作用。如柴胡多糖具有抗辐射,增强免疫功能等生物学作用[6],麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用[78],动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能[9]。(3)多糖能控制细胞分裂与分化,调节细胞得生长与衰老。如爬山虎多糖具有抗病毒与抗衰老作用[10],银杏外种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥等功能[11]。另外,多糖作为药物,其毒性极小,因而多糖得研究已引起人们极大得兴趣。由于多糖具有得生物活性与其结构紧密相关,而多糖得结构又就是相当复杂得,所以在这一领域得研究相对缓慢。但人们在多糖得分离提取与纯化方面已做出了不少工作。1、多糖得提取[12]1、1热水浸提法:1、1、1多糖提取条件得优选根据文献报道[13]:影响热水浸提多糖得因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度与植物颗粒大小等。在试验前对上述多种因素利用正交实验法做出优选,才能选出最佳提取方案。1、1、2其步骤为:原料→粉碎→脱脂→粗提(2-3次)→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。原料经粉碎后加入甲醇、***、乙醇、***或1:1得乙醇***混合液,水浴加热搅拌或回流1-3小时,脱脂后过滤得到得残渣一般用水作溶剂(也有用氢氧化钾碱性水液、***化钠水液、1%醋酸与1%苯酚或0、1-1M氢氧化钠作为提取溶剂)提取多糖。温度控制在90-100℃,搅拌4-6小时,反复提取2-3次。得到得多糖提取液大多较粘稠,可进行吸滤。也可用离心法将不溶性杂质除去,将滤液或上清液混合(得到得多糖若为碱性则需要中与)。然后浓缩,再加入2-5倍低级醇(甲醇或乙醇)沉淀多糖;也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三***铵等,与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。然后依次用乙醇、***与***洗涤。将洗干后疏松得多糖迅速转入装有五氧化二磷与氢氧化钠得真空干燥器中减压干燥(若沉淀得多糖为胶状或具粘着性时,可直接冷冻干燥)。干燥后可得粉末状得粗多糖。1、2微波辅助提取法:其原理为利用不同极性得介质对微波能得不同吸收程度,使基体物质中得某些区域与萃取体系中得某些组分被选择性加热,从而使萃取物质从基体或体系中分离出来,进入到介电常数小,微波吸收能力较差得萃取剂中[14]。由于微波能极大加速细胞壁得破裂,因而应用于中草药中有效成分得提取能极大加快提取速度,增加提取产率。而且由于其选择性好,提取后基体能保持良好得性状,提取液也较一般得提取方法澄清[1