移液器操作技巧.doc

移液器操作技巧前言:移液结果会很容易受到使用技法的影响。为了获得最佳结果,需要采用良好的移液技法。技巧1:一致性在按压与释放定位销时,需要保持一致的节奏、速度和技法。吸液速度过快会导致套柄与活塞喷溅、产生气雾以及受到污染,甚至导致样品量损耗。一致性可使准确度提高达5%。技巧2:正确填充吸头当某一吸头的建议(标称)范围为最大吸头容量(标称容量)的10%至100%时,可在35%至100%这一较小以及优化的范围内实现最高精确度。在如此小的范围内移液会减少对操作人员技法的要求,并可将结果准确度提高约1%。当达到标称容量的50%时可提供最佳结果。技巧3:吸液时保持垂直入水角使入水角尽可能地接近垂直位置–否则垂直液柱较小,这样将会吸入过多样品。(分液时,吸头应当与容器壁保持较小角度,从而确保良好的排液效果。关于分液的更多技巧将在下一期电子快讯中提供)使用垂直位置(尤其是使用微量移液器时),可使准确度提高达2%。技巧4:一致性千分尺设置始终从同一方向设置您的千分尺。最好从高至低进行:在将容量设置从高容量减少降至低容量时,只需将表盘下调至所需容量设置。提高容量设置时,转动选择轮使其略微超过所需容量,然后缓慢回调至正确设置。这可避免机械回冲。%。技巧5:吸头入水深度正确的吸头入水深度对于微量移液器尤为重要。如果吸头入水过深,则随着压力的加大,吸液量将会增多。保留在吸头表面的液体会影响结果。如果吸头未入水过深,则会造成空气进入,从而产生气泡以及导致容量不准确。正确的入水深度可使准确度提高达5%。 移液器容量 入水深度 2 与10ul 1mm 20与100ul 2-3mm 200与1000ul 3-6mm 5000ul与10ML 6-10mm技巧6:分液技法对于大多数应用而言,建议在分液时将吸头的末端贴靠容器壁。这可减少或者消除分液后残留在吸头上的样品。沿侧壁向上滑动吸头末端将移液器拆下,从而去除吸头孔处的任何残留液滴。此技法可使结果准确度提高达1%。另一种技法是直接分液到液体表面。使用诸如RAININFinePoint吸头之类的薄壁吸头十分重要,这是因为这些吸头允许充分排液。如果直接分液至液体中,则建议进行反向模式移液,从而防止分液后吸液。技巧7:预清洗移液前至少预清洗两遍,从而补偿位于吸头内部的液体。这还有助于中和毛细管效果以及使移液器内部的空气温度等于样品温度。使用正在分液的相同液体进行预清洗。使用吸头吸液,然后将其重新分液至储罐或者废液箱预清洗可为所有等分溶液提供相同的接触表面当与水液一同使用时,%技巧8:预清洗异常处理尽管预清洗在大多数情况下可提高准确性,但是当对非常温和或者冰冷的溶液进行移液时,它会对结果产生不利影响。不建议进行预清洗的例外情况为:-对非常冰冷的溶液(如:冰浴)进行移液-对37°C或以上的温和溶液进行移液对温和或者冰冷溶液进行预清洗有可能造成高达5%的错误率。技巧9:恒定室温在恒定室温条件下移液。移液的理想室温为+-°C,此温度同样适用于校准。防止温度大幅度或者突然变化,这是因为移液器中的空气无法足够快速地适应,以及样品量可能会受到影响。在恒温条件下移液可使准确度提高达