食品毒理学实验.docx

实验一动物的一般操作技术实验目的和要求*毒理学研究需要用实验动物来进行各种实脸,通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用,获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等方面的资料,因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。通过本次学****毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术,掌握实验动物的选择、动物抓取和分组等技术。实验原理做毒理学实验,首先要了解实验动物选择的要求,实验动物分组、实验样品的采集、实验动物处死方法等。实验仪器设备:小鼠若干,手套15副,苦味酸酒精饱和液,%中性红或品红溶液,棉签,解剖剪刀10把,。实验内容步骚:(一)健康动物的选择无论选择哪种种属品系的动物进行实验,均要求选择健康的实验动物。健康动物检查时要求达到:外观体型丰满,被毛浓密有光泽、紧贴体表,眼睛明亮,行动迅速,反应灵活,食欲及营养状况良好。选择时重点检查以下几项:眼睛明亮,瞳孔双侧等圆,无分泌物耳耳道无分泌物溢出,耳壳无脓疮鼻无喷嚏,无浆性粘液分泌物皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。颈部要求颈端端正,如有歪斜提示可能存在内耳疾患,不应选作实验动物。消化道无呕吐、腹泄,粪便成形,肛门附近被毛洁净。神经系统无震颤、麻痹。若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圈摆动,应放弃该动物。四波及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。(二)实验动物的性别鉴定小鼠主要依据肛门与生殖孔间的距离区分,间距大者为雄鼠,小者为雌性。成年雄鼠卧位可见睾丸,雌性在腹部可见乳头。(三)抓取方法正确地抓取固定动物,是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下,确保实验顺利进行。小鼠的抓取方法先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台上向后位,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。(四)编号、标记方法1、。2、标记方法染色法:采用染科(苦味酸酒精饱和液)涂擦动物皮毛标记的方法进行编号。用毛笔或棉签蘸取染料涂于动物的不同部位,以苦味酸黄色斑点染料标记来表示不同号码。一般****惯涂在左前腿为1,左腰部为2,左后腿为3,头部为4,背部为5,尾基部为6,右前腿为7,右腰部为8,右后腿为9。如果动物编号超过10,需要10〜100号码时,可采用在上述动物的不同部位,再涂染另一种涂料斑点,即表示相应的十位数,即左前腿为 10,左腰部为20,以此类推。(五)实验动物的随机分组方法(随机数字表法)为了得到客观的剂量—反应关系。应将一群动物按统计学原则随机分配到各个试验组中。将实验单位随机分成三组设有动物X只,随机等分成Y组。将动物编号后,按上述方法,从随机数字表抄录X个数字,将各数一律以Y除之,并以余数1,2,3……代表各组。动物号码 1 2 3 4 5随机数目除Y后的余数要使各组的动物数相等,须把原归某组的动物改配到其他组去。可以随机数字表继续按斜角线抄录一个数字,得60,以有多出的一组现有只数除之,余数为几,就可以把第几个移入其他组。注意事项:在实验操作过程中,注意安全,以免被小鼠咬伤,防止小鼠丢失。同时要遵守实验操作规程。实验结果:掌握实验动物的一般操作、实验样品采集、实验动物处死方法等实验报告要求:实验报告应包含如下内容:原理、仪器和试剂、步骤、原始数据、计算结果。实验二动物染毒途径和方法实验目的要求:掌握常用的动物染毒途径和方法。实验原理:实验动物的一般染毒途径主要是皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射、腹腔注射、经口染毒、皮肤染毒和呼吸道染毒。实验仪器设备:实验动物:成年、健康小鼠二器材:注射器(,1ml)、消毒棉球、手套、5Oml烧杯。试剂:0,9%生理盐水(100ml,灭菌)。实验内容步骤:染毒的途径和方法多种多样,可根据实验目的、动物种类和药物剂型等情况确定。皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤。将连有针头的注射器刺入皮下。注射部位一般在大腿外侧、内侧、背部、耳根部、腹部。皮内注射皮内注射时需要将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧,在两指之间,将连有针头的注射器紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药物,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。肌内注射 肌内注射应选用肌肉发达、没有大血管通过的部位,一般多选臀部。注射时垂直刺入肌肉,回抽针栓无回血,即可进行注射。静脉注射一般采用尾静脉注射,鼠尾静脉有三根,左右两侧尾静脉比较容易固定,多采用。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用温水浸润或用酒精擦拭。以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,中指从下面托起尾巴,以无名指和小指夹住尾巴的末梢,右手持注射器,使针头与静脉平行,从尾下四分之一处进针,先缓慢注入少量药液,如无阻力,可继续注入