碧波TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)（细胞样本专用）1d.doc

碧波TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)（细胞样本专用）1d.doc碧波TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)(细胞样本专用)Storeat:-20°CforoneyearMADEBYBIOBOX碧波TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)(细胞样本专用)一、产品简介TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(ColorimetricTUNELApoptosisAssayKit)为您提供了种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜检测到凋亡的细胞。细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酣,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNAo细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNAladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核甘酸转移酶(TerminalDcoxynuclcotidylTransferase,TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被标记。这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。本试剂盒适用于细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。本试剂盒有如下优点:1、 高灵敏度:可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。2、 操作简便:使用Ready-to-Use型试剂,并配有DAB。3、 特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。4、 快速:仅需约3个小时即可完成。5、方便观察:使用光学显微镜观察实验结果,无需贵重设备。二、试剂盒组份组份Cat:BA2220Cat:BA2250Cat:-20°CTdT醇80uL200uL400uL-20°CStreptavidin-HRP10PL25PL50PL4°C避光Biotin-dUTP20pL50pL100mL-20°C避光DAB2mg5mg10mg-20°C避光三、 试剂盒以外自备仪器和试剂多聚甲醛、甲醇、乙醇、PBS、H2O2>TritonX-、复染染液:苏木素或***绿等;盖玻片、载玻片、染色缸、染色湿盒、光学显微镜、37°C孵箱、移液器等。四、 保存条件:-20°C保存,Streptavidin-HRP和DAB需避光保存。五、 注意事项:1、TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。2、 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。3、 使用前请认真阅读木说明书,提前准备好相关试剂。4、 因本试剂盒中组分均为微量,使用前请离心。5、 为避免试验误