细菌鉴定技术1精选课件常用细菌生化反应糖发酵试验吲哚试验(靛基质试验)***红试验V-P(Voges-Proskauer)试验枸橼酸盐(或柠檬酸盐)利用试验克氏双糖铁(KIA)复合试验动力、吲哚及脲酶(MIU)【原理】:各种细菌含有不同的分解糖(苷、醇)的酶,对糖(苷、醇)分解能力也各不相同,有的不分解,有的分解后仅产酸,有的分解后产酸产气,故可用来鉴别细菌。【方法】:将大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种葡萄糖、乳糖发酵管,35ºC培养18-24h观察结果。【结果】:首先确定细菌是否生长,细菌生长者培养基呈混浊状:1)不分解糖,培养基顔色与接种前无变化,以“-”表示;2)分解糖产酸不产气,培养基由紫色变为黄色,以“+”表示;3)分解糖产酸产气,除培养基顔色变化外,倒管中还有气泡,以“⊕”表示。大肠埃希菌分解葡萄糖和乳糖产酸产气,伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖。(靛基质试验)【原理】:有些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚,与吲哚试剂形成红色化合物。【方法】:大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于蛋白胨水培养基中,35ºC18-24h后,加入吲哚试剂数滴,静置分层,观察结果。【结果】:在培养物液面上层呈玫瑰红色为阳性,不变色者为阴性。大肠埃希菌为阳性,伤寒沙门菌为阴性。6精选课件7精选课件3.***红试验【原理】:某些细菌分解葡萄糖产生***酸,***酸可进一步分解为甲酸、乙酸等酸性物质,,加入***红指示剂后呈红色(阳性);有些细菌分解葡萄糖产生的酸进一步化为醇、***等非酸性物质,,加入***红指示剂后呈黄色(阴性)。【方法】:大肠埃希菌和产气肠杆菌分别接种葡萄糖蛋白胨水培养基中,35ºC18-24h,加入***红指示剂2-3滴观察结果。【结果】:红色为阳性,黄色为阴性。大肠埃希菌为阳性,产气肠杆菌为阴性。8精选课件-+-P(Voges-Proskauer)试验【原理】:某些细菌分解葡萄糖生成***酸,进一步脱羧生成乙酰***甲醇,在碱性环境下被氧化成二乙酰,后者与蛋白胨中的精氨酸所含的胍基起作用,生成红色胍缩二乙酰,为VP试验阳性。若培养基中胍基含量少,加入少量含胍基的化合物如肌酐,以加速其反应。【方法】:大肠埃希菌和产气肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋白胨水中,35ºC,24-48h,加入VP试剂甲液和乙液各1滴,充分摇动,观察。【结果】:红色为阳性,若为阴性应再培养4h观察,仍无红色者为阴性。大肠埃希菌阴性,产气肠杆菌阳性。10精选课件
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