S0PZL09QC00502福林酚测定标准操作规程.doc

1目的建立福林酚测定法,保证蛋白质含量检查有章可循。2范围适用于福林酚测定法的标准操作。《中华人民共和国药典》+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。,测定范围通常可达20~250。本法干扰物质较多,对双缩脲反应产生干扰的离子,同样容易干扰福林酚反应,且影响还要大。还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵、三羟***氨基甲烷缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。、碳酸钠、酒石酸钾、硫酸铜、钨酸钠、钼酸钠、磷酸、硫酸锂、盐酸、《试液与试纸配制标准操作规程》,。(蛋白质浓度应与对照品溶液基本一致)。、、、、、(对照品溶液取用量可在本法测定范围内进行适当调整),分别置具塞试管中,,,摇匀,室温放置10分钟,各加入福林酚试液[取福林试液中的贮备液(2mol/L酸浓度)1→16],立即混匀,室温放置30分钟,照《紫外-分光光度法标准操作规程》在650nm的波长处测定吸收度;同时以0号管作为空白。以对照品溶液浓度与其相对应的吸光度计算线性回归方程。另精密量取供试品溶液适量,同法测定。从线性回归方程计算供试品溶液中的蛋白质浓度,并乘以稀释倍数,即得。4附件无5培训培训部门:质量部培训对象:QC成员6变更历史变更前版本号变更后版本号变更原因变更批准日期SOP·ZL·09·QC·005·01SOP·ZL·09·QC·005·02执行2015年版药典2015年10月30日