酶标仪系列介绍.ppt

DNM-9606型酶标分析仪DNM-9602G自动酶标分析仪DNM-9602A酶标分析仪DNM-9602型酶标分析仪系列酶标分析仪系列酶标分析仪酶标仪的原理及应用仪器原理与作用光学比色原理比色原理:许多化学物质的溶液具有颜色,或者本来无色,当加入显色剂后呈现颜色。并且溶液颜色的深浅,随溶液浓度的改变而改变,浓度越大,颜色越深。所以可以用比较溶液颜色深浅的方法,来间接确定有色溶液浓度的大小,从而实现了对溶液中所含物质的有无或多少进行定性或定量分析的目的。目测比色法:这是一种用眼睛直接观察溶液颜色深浅的比色法。按溶液浓度由大到小配成系列标准浓度(已知值),分装在试管内,按顺序排好,然后将待测样本液管与之逐个比较,看哪个标准管的颜色与待测管相近,便读取该标准管的浓度值,作为待测样本的浓度值,或者将待测样本分别与阴性对照液、阳性对照液进行比较,来确定待测样本是阴性还是阳性。该方法是一种原始的检验方法,由于不同人的分辨能力不同等人为因素的影响,目测法不可靠,也不准确。系列酶标分析仪酶标仪的原理及应用仪器原理与作用光电比色法:利用光电探测元件(光电池)代替目测,将一束光射入待测溶液,由于浓度不同的有色溶液对光的吸收程度不同,光电元件接收到的光信号大小不同,仪器将接收的光信号转换成电信号进行处理,最终计算出待测溶液的浓度。这就排除了人为因素的影响,大大提高了检测的灵敏度和可靠性。光电检测元件数据处理系统结果输出入射光透射光待测液系列酶标分析仪酶标仪的原理及应用仪器原理与作用物质对光的选择性吸收:(工作波长的概念)我们知道,不同的物质,只吸收与之对应的某个波长的光子能量。其本质就是只有当某一波长的光子能量恰好等于某物质分子(或原子)不同能级间的跃迁能量时,分子(原子)才会吸收这种光能,引起能级跃迁,因此每种物质都有自己特定的吸收光谱。也即我们常说的,某种物质在某个波长时有最大吸收(吸收峰),而对其他波长的光几乎不吸收或很少吸收。很显然,为了提高检验的灵敏度,就应该选择被测物质的吸收峰波长作为检验波长。这样,只要待测溶液中含有少量被测物质,该物质就会对入射光产生明显的吸收。因此为了提高检验灵敏度,光电比色仪器,都选用单色光作为检验的工作波长。同时为了减少其它物质对检测的不利干扰,单色光的纯度应该很高。系列酶标分析仪酶标仪(ELISA法)的检验原理现以“双抗原夹心法测抗体”为例进行说明。临床检验时,首先将能与待测抗体特异结合的抗原吸附于固相载体(包被在聚苯乙烯微孔反应板的孔壁)上,然后加入待测血清进行反应。如果其中含有待测的抗体,则可与已吸附(包被)在孔壁上的抗原发生特异结合,形成复合物。再加入已经过酶标记的特异抗原,使与待测抗体反应结合,这样在酶标板孔壁上就形成了包被抗原+待测抗体+酶标记抗原的三者复合物,并被牢固地吸附在孔壁上,然后加入底物液显色。如果这时候反应孔内只有被吸附的酶催化底物发生显色反应,则显色的深浅与待测物的含量多少是呈确切对应关系的,但此时并非如此。系列酶标分析仪酶标仪的原理及应用光的吸收定律:(吸光度的概念)光的吸收定律(朗伯-比耳定律)是光电比色分析仪的光学理论基础。内容是:在一定条件下,当入射光一定时,溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度成正比。注意:以上定律的应用是有条件的,比如温度、溶液的浓度范围等,否则会引起测量结果对定律的偏离,所以各试剂厂家都对试剂的检验线性范围作出了规定。光电比色计:是一种相对测量仪器,根据比色原理,要想测得待测液的浓度,首先应先配制已知浓度的标准溶液,并在相同的条件下,分别测出标准溶液和待测溶液的吸光度,然后应用朗伯-比耳定律,即可计算出待测溶液的浓度。系列酶标分析仪酶标仪的原理及应用如果溶液的浓度与其吸光度呈非线性关系时,应先配制系列浓度的标准液,并测出对应的吸光度值,然后顺序用弧线连接各相邻点,画出标准曲线。当测得待测液的A值后,即可在标准曲线上查出对应的浓度值。说明:DNM-9602系列酶标仪,可以根据标准液浓度和吸光度的不同相关关系,直接选用不同的数学分析方法将待测样本的浓度值直接计算出来(见定量计算部分),从而省去了检验人员画标准曲线和在标准曲线上查找结果的复杂工作。系列酶标分析仪酶标仪的主要参数吸光度检验:当酶标板被送进仪器时,首先测得入射光的输出电压信号V0。然后仪器再测得已加入待测液的各孔的信号即透射光的输出信号强度(Vt)。仪器自动利用光吸收定律计算出各孔的吸光度值:A(OD)=log(V0/Vt),这个值在临床上一般称为原始吸光度。空白孔的作用:临床检验空白值的定义:除待测物以外所有伴随物(含比色容器,溶剂,干扰物等)产生的吸光度值。由于酶标板在制造时间、工艺、材料、厂家的不同,使每块酶标板之间可能存在差异(空白值不同),为了消除这种差异引起的检测误差,要求每块板做检