黄芩中黄芩苷的正交提取工艺及体外抑菌活性研究.doc

黄芩中黄芩苷的正交提取工艺及体外抑菌活性研究赵强(甘肃工业职业技术学院化工学院)摘要:采用正交提取法提取黄芩中黄芩苷,采用HPLC对提取物进行检测,以CloversilC18色谱柱,乙***-%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱。柱温30℃,进样量5μL,,240-280nm波长紫外检测。对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌进行体外最小抑制浓度(MIC)测定,并运用透射电子显微镜从超微结构探讨了黄芩苷对两种供试菌的作用机理。结果表明:其最佳正交提取工艺为A2B2C3,即乙醇浓度70%、乙醇体积100mL、冷浸时间36h;对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为:/mL;在透射电镜下观察到黄芩苷可改变细菌的细胞内、外膜的渗透性而使细胞膜破坏,并伴随大量内溶物(DNA和mRNA)的溢出,从而起到抑菌作用。关键词:黄芩苷;正交提取;体外抑菌黄芩(Scutellariabaicalensis)为唇形科植物黄芩(i.)的干燥根,味苦、性寒。具有清热燥湿,泻火解毒,止血、安胎的功效[、6]。主治湿温、暑温胸闷呕恶、湿热痞满、泻痢、黄疸、肺热咳嗽、高温烦热、胎动不安等症。黄芩是祖国医学中常用中药,来源丰富、价廉。黄芩苷是黄芩的主要有效成份,本实验主要通过化学正交提取实验,探究出黄芩中黄芩苷提取量的影响因素,优化实验设计,并将提取出的黄芩苷对供实菌进行抑菌实验,以为相关疾病的防治和临床应用,及开发天然抗菌药物提供一定的理论依据。(购买于甘肃省天水市中药材供应站,经自然风干,粉碎)。-500D型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公式产品)、RE52-99 旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂产品)、ZDP-2120型电热培养箱(上海智城分析仪器制造有限公司产品)、UV-9200型紫外-可见光分光光度计(北京瑞利仪器分析有限公司产品)、AB104-S型精密电子分析天平(瑞士梅特勤公司产品)索氏提取器(昆山市超声仪器有限公司产品)、Agilent1100Series型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)可变波长紫外检测器(VWD)、色谱工作站为CAGBootpSerier、色谱柱为CloversilC18柱(×150mm,5μm)、(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。95%乙醇、甲醇、黄芩苷标准品、乙***、甲酸、三重蒸馏水等,其余试剂均为国产或进口分析纯。,按规定方法配制,分装灭菌备用。大肠埃希氏杆菌(Escherichiacoli,35216)、金黄色葡萄球菌(usaureus,26111)为天水师范学院生物工程实验室保存标准菌株。,按表1的L9(33)正交实验提取条件冷浸,经超声波震荡后,转入索氏提取器中,回流加热提取,再转入旋转蒸发器中减压浓缩至干,然后把提取的黄芩苷溶解在70%甲醇中,进行HPLC分析。。色谱柱:CloversilC18柱(×150mm,5μm),检测波长240-280nm,柱温30℃,进样量5μL,,流动相V(乙***)∶V(甲酸)